Szlak sygnalizacji Wnt jest kluczowym regulatorem homeostazy nabłonka jelitowego i jest zmieniony w większości nowotworów jelita grubego. Podczas gdy rola nieprawidłowej, kanonicznej, zależnej od β-kateniny sygnalizacji Wnt została dobrze poznana w promocji raka jelita grubego, znacznie mniej wiadomo o roli, jaką odgrywa niekanoniczna, niezależna od β-kateniny sygnalizacja Wnt w tym typie nowotworu. Celem niniejszej pracy było scharakteryzowanie niekanonicznego szlaku transdukcji sygnału w komórkach raka jelita grubego. W tym celu wykorzystano prototypowy niekanoniczny ligand, Wnt5a, w porównaniu z Wnt3a, prototypowym kanonicznym ligandem aktywującym β-kateninę. Analiza profilu ekspresji receptorów Wnt w liniach komórkowych raka jelita grubego wykazała wyraźny wzrost zarówno poziomu ekspresji, jak i różnorodności typów receptorów Frizzled ulegających ekspresji w komórkach raka jelita grubego w porównaniu z komórkami nienowotworowymi. Stwierdziliśmy, że Wnt5a aktywuje typowy niekanoniczny szlak sygnałowy Wnt/Ca++ w komórkach raka jelita grubego, indukując hiperfosforylację Dvl1, Dvl2 i Dvl3, promując mobilizację Ca++ w wyniku aktywacji fosfolipazy C (PLC) przez wrażliwe na toksynę krztuścową białko G oraz indukując zależną od PLC migrację komórek. Stwierdziliśmy również, że podczas gdy aktywność kinazy tyrozynowej ko-receptora Ror2 nie jest wymagana do mobilizacji Ca++ indukowanej przez Wnt5a, jest ona wymagana do hamującego wpływu Wnt5a na aktywność transkrypcyjną zależną od β-kateniny. Nieoczekiwanie stwierdziliśmy, że chociaż prototypowy ligand kanoniczny Wnt3a był wyjątkowy w stymulowaniu aktywności transkrypcyjnej zależnej od β-kateniny, to jednocześnie aktywował PLC, promował mobilizację Ca++ oraz indukował zależną od Rho kinazy i PLC migrację komórek. Nasze dane wskazują zatem, że ligand Wnt może aktywować jednocześnie tzw. kanoniczne i niekanoniczne szlaki Wnt, indukując powstawanie złożonych sieci sygnałowych integrujących oba szlaki w komórkach raka jelita grubego.