Fluorescence recovery after photobleaching (FRAP) je technika fluorescenčního mikroskopu pro měření molekulární difuze a transportu. FRAP je cennou technikou v buněčném biologickém výzkumu a vyvíjela se společně s rozvojem mikroskopů a fluorescenčních sond. Ačkoli byla vyvinuta v 70. letech 20. století, objev a další vývoj fluorescenčních proteinů způsobil revoluci v metodě FRAP. Po objevu zeleného fluorescenčního proteinu a jeho použití jako neinvazivní a geneticky kódované proteinové značky se staly možnými studie dynamiky a interakcí proteinů in vivo. FRAP je založena na nevratném vybělení bazénu fluorescenčních sond a sledování obnovy fluorescence v důsledku pohybu okolních neporušených sond do vyběleného místa. Ačkoli jsou měření jednoduchá, kvantitativní FRAP vyžaduje pečlivý návrh experimentu, pevné kontroly, sběr dat a analýzu. V posledních letech bylo několik technik souvisejících s FRAP přizpůsobeno konkrétním otázkám buněčné biologie, včetně inverzní FRAP, ztráty fluorescence při fotobleachingu a lokalizace fluorescence po fotobleachingu.

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna.