Fluorescence recovery after photobleaching (FRAP) jest techniką mikroskopu fluorescencyjnego do pomiaru dyfuzji i transportu molekularnego. FRAP jest cenną techniką w badaniach biologicznych komórek i ewoluował wraz z postępem mikroskopu i sond fluorescencyjnych. Chociaż FRAP został opracowany w latach 70-tych, odkrycie i dalszy rozwój białek fluorescencyjnych zrewolucjonizowały FRAP. Po odkryciu białka zielonej fluorescencji i jego zastosowaniu jako nieinwazyjnego i genetycznie kodowanego znacznika białkowego, możliwe stały się badania in vivo dynamiki i interakcji białek. FRAP opiera się na nieodwracalnym wybielaniu puli sond fluorescencyjnych i monitorowaniu powrotu fluorescencji w wyniku przemieszczania się otaczających nienaruszonych sond do wybielonego miejsca. Chociaż pomiary są proste, ilościowy FRAP wymaga starannego zaprojektowania eksperymentu, solidnej kontroli, zbierania danych i analizy. W ciągu ostatnich lat, kilka technik związanych z FRAP zostało dostosowanych do konkretnych pytań związanych z biologią komórki, włączając w to odwróconą FRAP, utratę fluorescencji podczas fotobielenia i lokalizację fluorescencji po fotobieleniu.

Dodaj komentarz

Twój adres e-mail nie zostanie opublikowany.