Fluoresenssin palautuminen fotobleachingin jälkeen (FRAP) on fluoresenssimikroskooppitekniikka, jolla mitataan molekyylien diffuusiota ja kuljetusta. FRAP on arvokas tekniikka solubiologisessa tutkimuksessa, ja se on kehittynyt yhdessä mikroskoopin ja fluoresenssikoettimien kehittymisen kanssa. Vaikka FRAP kehitettiin 1970-luvulla, fluoresoivien proteiinien löytäminen ja edelleen kehittäminen mullistivat sen. Vihreän fluoresenssiproteiinin löytämisen ja sen soveltamisen jälkeen ei-invasiivisena ja geneettisesti koodattuna proteiinimerkkinä proteiinien dynamiikan ja vuorovaikutusten in vivo -tutkimukset tulivat mahdollisiksi. FRAP perustuu fluoresoivien koettimien pooliin, joka valkaistaan peruuttamattomasti, ja seurataan fluoresenssin palautumista, joka johtuu ympäröivien ehjien koettimien siirtymisestä valkaistuun kohtaan. Vaikka mittaukset ovat yksinkertaisia, kvantitatiivinen FRAP vaatii huolellista koesuunnittelua, vankkoja kontrolleja, tiedonkeruuta ja analysointia. Viime vuosina useita FRAP:iin liittyviä tekniikoita on räätälöity vastaamaan tiettyjä solubiologisia kysymyksiä, mukaan lukien käänteinen FRAP, fluoresenssihäviö fotobleachingissa ja fluoresenssin lokalisointi fotobleachingin jälkeen.

Vastaa

Sähköpostiosoitettasi ei julkaista.