Abstract

Morinda citrifolia L. (noni) has been treated different disorders.For the motifolids in DSS. しかし、腸の炎症の治療における役割に関するデータはまだ解明されていない。 本研究では、デキストラン硫酸ナトリウム（DSS）に9日間連続暴露したC57BL/6マウスの治療におけるノニ果汁（NFJ）の効果について検討した。 NFJの摂取は、病気の臨床症状の軽減や体重減少に影響を与えなかった。 しかし、1：10の希釈液を使用した場合、マウスの腸の構造は維持され、炎症性浸潤の減少を伴っていた。 NFJの濃度にかかわらず、ミエロペルオキシダーゼの活性と主要な炎症性サイトカインであるTNF-αおよびIFN-γの両方の減少も腸で観察された。 さらに、NFJを1 : 10および1 : 100に希釈した場合、腸管ホモジネートにおいて一酸化窒素およびIL-17の産生量の減少が検出された。 全体として、NFJによる治療は、病気の進行や悪化に関連するさまざまな側面で有効であった。 これらの結果は、ノニ果実が炎症性腸疾患のような炎症性疾患の進行を抑制する大きな可能性を持つ抗炎症性分子の重要な供給源であることを示唆していると思われる。 はじめに

炎症発症のキープレーヤーのダウンレギュレーションにおけるいくつかの天然化合物の潜在的な抗炎症活性は、サイトカイン、転写因子、酵素、およびタンパク質と非タンパクの炎症メディエーターの産生の調節を含むさまざまなシナリオで探索されてきた。 これらの活性には、サイトカイン（IL-6、TNF-α、IFN-γ、IL-17、IL-12など）、転写因子、酵素（myeloperoxidase-MPO、cyclooxygenase COX-1, COX-2など）、さらに一酸化窒素（NO）産生の調節が含まれる。 これらの分子は炎症の制御に重要であるため、関節リウマチ、皮膚炎、炎症性腸疾患（IBD）などの炎症性疾患の予防や治療に役立つ可能性が示唆されています。 IBDは、消化管の慢性炎症性疾患で、臨床的にはクローン病（CD）または潰瘍性大腸炎（UC）の2つの疾患のうちの1つとして認められます。

Morinda citrifolia L. (ノニ) は、ルビー科に属し、ポリネシア人によって2000年以上にわたって薬用植物として使用されてきた天然分子の供給源である。 これまでに、ノニの果実からは、脂肪酸、フラボノイド、多糖類、ステロールなど、いくつかの生理活性物質が単離されている . ノニ果実の化合物の抗炎症作用は、ヘリコバクター・ピロリ感染の実験モデルで、エタノールと酢酸エチル抽出物を用いて実証されている。 これらの抽出物は、好中球の化学走性、誘導性一酸化窒素（iNOS）およびCOX-2の産生の両方を減少させることができた。 C57BL/6マウスにノニ果汁を500 mg kg-1 day-1で60日間経口投与したところ、Leishmania amazonensisに感染した足蹠の炎症浸潤とIL-12、TNF-α、TGF-βおよびIL-10のサイトカイン発現が減少した。 IL-12、IL-6、TNF-α、IFN-γ、IL-17、IL-23などのサイトカインはIBDの発症や悪化に関連するため、この炎症性疾患を治療するために異なるアプローチがなされていることは重要である。 さらに、モリンダシトリフォリア葉エキスの抗炎症作用は、リポポリサッカライド（LPS）で刺激したマクロファージにおけるTNF-α、IL-1β、NOレベルの減少によって示されました。 ノニ果実の化合物が炎症プレイヤーの制御に果たす役割は特に重要であるにもかかわらず、腸の炎症発生におけるその効果についてはまだ十分に検討されていない。

そこで本研究では、ノニ果汁の免疫調節活性の基礎メカニズムとして、デキストラン硫酸ナトリウム誘発大腸炎マウスモデルにおけるサイトカインの相互作用と腸の構造に対する効果を示した。

2. 材料と方法

2.1. 採取と植物の同定

本研究で使用した果実は、ブラジルTriângulo Mineiro/MG州Araguari市の農場Fazenda Boa Vontadeで150株のノニを単一栽培し、座標18度43分47秒で得られたものである。23′′S, 48°6′49.50′′O (data from Google Earth, 2013). 標本はすべて従来のherborization技術に従って調製し、登録番号HUFU-67210でMorinda citrifolia L. (Rubiaceae) としてUberlândia連邦大学のherbarium (HUFU Herbarium) に寄託した

2.2. ジュース抽出工程

Morinda citrifolia (noni) ジュースは、ブラジル、ミナスジェライス州ウベラバにあるウベラバ大学の生薬学研究室で調製されました。 M. citrifoliaの果実を150株から手作業で無作為に採取し、オゾン水で洗浄後、室温で3～5日間保存した。 果実はフルーツデパルパーを使用して機械的に脱パルプし、種子を除去した後、得られたパルプを冷蔵下で上澄みが透明になるまで4000rpmで遠心分離し、これを100％（v/v）ジュースとし、さらに使用するまで-70℃で保存した

2.3. 動物試験

生後6〜8週、体重20〜25gの雄のC57BL/6マウスを、ブラジル、トリアングロミネイロ連邦大学（UFTM）の動物収容施設において、12時間の明暗サイクルで一定温度（25℃）、餌および水への自由なアクセスとともに、特定の病原体を含まない標準制御環境条件において飼育した。 すべての動物実験は、UFTMのInstitutional Animal Care and Use Committeeのプロトコル275に準拠して実施した。 実験は以下の8匹のマウス／グループで行った：生理食塩水、生理食塩水で処理した健康なコントロールマウス；DSS 2.5％、デキストラン硫酸ナトリウム（DSS）に暴露したマウス；DSS 2.5% + ピュアノニ、DSSに暴露し、純粋ノニ果汁で処理したマウス；DSS 2.5％＋ノニ1：10、DSSに暴露し、ノニ果汁の1：10希釈液で処理したマウス；およびDSS2.5％＋ノニ1：100、DSSに暴露し、ノニ果汁の1：100希釈液で処理したマウスであった。 マウス1匹あたり100μlの量を9日間連続で経口投与した。

2.4. DSS誘発大腸炎と臨床評価

2.5% DSS (MP Biomedicals, Illkirch, France, Molecular weight: 36,000-50,000 kDa) を飲料水に連続添加し9日間大腸炎を誘発し、サンプル採取を行った。 毎日の摂餌量と摂水量の記録に加えて、体重の変化と疾患の臨床症状を毎日評価し、すべてのマウスの臨床疾患スコアを得た。 動物が示す各症状を1点とし、各マウスの点の合計を臨床的スコアとした。 臨床スコアは、本明細書において先に記載したように決定された.

2． 安楽死およびサンプル収集

マウスを9日目に安楽死させ、さらなる分析のために結腸を摘出した。 結腸試料は、パラフィン包埋のためにPBS／10％ホルムアルデヒドに浸漬されるか、または酵素アッセイによるミエロペルオキシダーゼ（MPO）または一酸化窒素（NO）活性の定量のために液体窒素中で直ちに凍結されたより小さな切片に分割された。 さらに、酵素結合免疫吸着法（ELISA）によるサイトカイン定量化のために、各マウスから1つの腸切片をプロテアーゼ阻害剤を含む溶液（Complete®、Roche Pharmaceuticals, Mannheim, Germany）中に採取した＜7443＞＜2324＞2.6。 Myeloperoxidase (MPO) and Nitric Oxide (NO)

MPOアッセイでは、切片をホモジナイズして赤血球を溶解させた。 遠心分離後に得られたペレットを再懸濁し、その後、3回の凍結融解サイクルを行った。 遠心分離後，上清を96ウェルプレートに入れ，テトラメチルベンジジン（TMB）基質（BD OptEIA™, San Diego, CA）を用いて37℃で発色させた． 反応を停止し、分光光度計で450 nmの波長で読み取りを行った。 MPO活性は、以前に記載したように決定した。 結果は各腸切片の乾燥重量で規格化し、組織1gあたりの光学密度（nm/g of tissue）で表した。

NOの測定では、NO産生の指標として腸管ホモジネートに蓄積した亜硝酸塩をGriess反応により測定した 。 組織ホモジネート100μLに1%(w/v) sulfanilamide in 5%(v/v) phosphoric acid, 0.1%(w/v) naphthyl-ethylenediamine-HCl の等量からなるGriess試薬100μLを混合し、室温で10分インキュベートした。 96ウェルプレートリーダー（Perkin Elmer Cetus, CA, USA）を用いて540 nmで吸光度を測定した。 亜硝酸ナトリウムの連続希釈標準曲線の吸光度を線形回帰分析することにより、試料中の亜硝酸塩量を算出した。 結果は各腸切片の乾燥重量で正規化し、組織1グラムあたりのピコグラム/ミリリットル（pg/ml/g）で表した

2.7. ELISAによるサイトカイン定量化＜3902＞＜5745＞サイトカインIL-10、IL-17、IFN-γ、TNF-α、IL-12、IL-4、及びIL-23を、製造者の指示書に従ってELISAにより組織ホモジネート中で定量した（BD Biosciences、サンノゼ、カリフォルニア、アメリカ）。 結果は、各腸切片の乾燥重量で正規化し、組織1グラムあたりのナノグラム／ミリリットル（組織1グラムあたりng／mL／g）として表した

2.8. 組織学および病理学的分析

ミクロの損傷を評価するために、腸の切片を縦に切り、PBSで洗浄し、10％緩衝ホルマリンで24時間固定し、パラフィン包埋とミクロトーム切片作成のために処理した。 組織切片（5μm）を得、ヘマトキシリン・エオジン（H&E）で染色した。 病理組織学的解析のために、粘膜、粘膜下層、筋層、および漿膜を評価した。 これらの腸切片は、浮腫、炎症性浸潤、および上皮異常の存在についても評価した。

画像は、デジタルビデオカメラ（Evolution MP 5.0 color Media Cybernetics, Silver Spring, MD, USA）と10倍の対物レンズを使用し、光学顕微鏡（Nikon Eclipse 50i, Melville, NY, USA）に接続して撮影した。 形態計測は、Image-Pro Insight（Media Cybernetics）を用いて行った。 炎症性浸潤は、炎症性浸潤を含む損傷領域を、取得した画像で可視化された組織の総面積で割ったものに基づいて測定し、パーセント（%）で表した。 治療について盲検化された訓練された病理学者が病理組織学的分析を行った

2.9. データ解析と統計学

すべての変数について正規分布と均質分散が検定された。 分布が正規で分散が均質であると考えられる場合、パラメトリック検定を用いた: 対になっていないスチューデント検定または一元配置分散分析に続くテューキーのポストホック検定。 データの分布が非ガウス分布の場合は，以下のノンパラメトリック検定を用いた． Mann-Whitney 検定または Kruskal-Wallis 検定と Dunn のポストホックテストを併用した。 結果は平均値±SDで表した。 観察された差は、(5%)のときに有意であるとみなされた。 統計解析は、GraphPad Prism, version 5.0 (La Jolla, CA, USA)を用いて行った。 ノニ果汁の投与と疾患の転帰

まず、ノニ果汁が体重減少およびDSS誘発大腸炎の転帰を防ぐことができるかどうかを評価するために、材料と方法に記載したように、マウスを9日間DSSに曝露した後、果汁を投与した。 ノニ果汁群は、対照群（DSS 2.5%）と比較して、体重減少を抑えることができなかったようです（図1（a））。 さらに、使用した濃度にかかわらず、ノニ果汁を投与したマウスでは、未投与のマウスに対して、疾患の臨床症状の発現に影響は見られなかった（図1(b) ）。

(a)

(b)

(a)
(b)

3.2. ノニ果汁の摂取は、用量依存的に炎症を抑制し、腸の構造を維持する

その後、ノニ果汁を投与しても巨視的効果が認められなかったため、果汁の摂取が腸の構造に対して微視的効果を持つかどうかを調べることを目的としました。 その結果、ノニ果汁を摂取したグループは、用量依存的に、腸の構造を維持できることが観察されました。 健康なマウス（図2（a））では、上皮の表面は保存され、習慣的な数の杯細胞で構成された長方形の陰窩があった。 腸管固有層には、通常の単核球の浸潤が認められた。 粘膜下層，筋層，漿膜は正常であった． DSSに暴露されたマウスは、腸管上皮の表面にびらんを生じ、陰窩を欠いた（Table 1）。 固有層は中程度の浮腫と単核球浸潤（図2（b）、矢印）、粘膜下層は中程度の単核球浸潤と重度の浮腫（図2（b）、矢印）、筋層はやや肥厚し、大腸炎活性を認めた。 DSSに暴露し、純粋なノニジュースを投与したマウスでは、陰窩の不整は少なく軽度であり（表1）、固有層には中程度の浮腫（図2（c）、矢印）と単核球浸潤（図2（c）、矢印）が認められたが、粘膜下層には軽度の単核球浸潤と中程度の浮腫しか検出されず、筋肉層はわずかに肥厚していた。 一方、ノニ果汁を1：10で希釈して投与したマウスでは、陰窩は凹凸が保たれ（図2（d）、アスタリスク）、固有層は中程度の浮腫（図2（d）、矢印）と単核球浸潤（図2（d）、矢頭）が見られ、粘膜下層は軽度の単核球浸潤と中程度の浮腫のみとなった（表1）。 ノニ果汁を1：100で希釈して投与したマウスでは、陰窩は不規則で萎縮し（図2（e）、アスタリスク）、固有層は中程度の浮腫と単核球浸潤、粘膜下層は軽度の単核球浸潤と中程度の浮腫が見られた（表1）。 一般に、ノニ果汁を投与したマウスでは腸小窩の構造が保たれており、純粋なノニまたはDSSを投与したマウスと比較して、1 : 10および1 : 100希釈のノニ果汁を投与したマウスでより保たれていた。

DSS 2.5% DSS 2.5% + pure noni DSS 2.5%+ノニ 1 : 10 DSS 2.5% + pure noni 1 : 10 ＜ノニ>DSS2。5% + noni 1 : 100 Irregular Lamina propria edema Moderate Mild Moderate Submucosal浮腫Severe Moderate Moderate Mucosal mononuclear infiltrate Moderate Mild Moderate 粘膜下単核球浸潤 軽度 軽度 Mild 腸管小室 不在 連続的

Table 1

DSS に曝露したマウスの異なる条件での病理組織学的スコア。

(a)

(b)

(a)
(c)

(d)

(e)

(a)
(b)
(c)
(d)
(e)

図2

＜4863>ノニ果汁摂取は用量に応じて腸の構築性を保存していることが判明依存的である。 C57BL/6マウスをデキストラン硫酸ナトリウム（DSS）2.5%に曝露し、ノニ果汁を毎日投与した。 9日目に結腸を採取し、病理組織学的分析を行った。 (a)大腸炎を起こしていない健康なマウス、(b)DSSに暴露したマウス：中程度の浮腫と単核細胞浸潤（矢頭）を有する層状固有層、中程度の単核細胞浸潤と重度の浮腫（矢印）を有する粘膜下層、(c) DSS暴露と純粋ノニ果汁投与マウス：DSSに暴露しノニ果汁を投与したマウス：DSSに暴露しノニ果汁で毎日処理したマウス。 中程度の浮腫（矢印）と単核球浸潤（矢頭）を有する固有層；（d）DSSに暴露し、1.0%に希釈したノニ果汁で処理したマウス。 (e)DSSに暴露し、1 : 100で希釈したノニ果汁で処理したマウス：規則的で萎縮した陰核（アスタリスク）；中程度の浮腫（矢印）と単核球浸潤（矢印）を有する薄板原線維。

NOの産生は、純粋なノニまたはDSSを受けたものに関連して、1：10および1：100に希釈したノニ果汁で処理したマウスで減少した（図3（a））。 さらに、使用した濃度にかかわらず、ノニ果汁を投与したマウスは、DSSを投与したマウスと比較して、MPOの活性が低下した（図3（b））。 体重減少や疾病転帰はノニ果実の摂取に影響されないにもかかわらず、腸管構造の改善と炎症に関与する酵素の活性低下は、果汁摂取と用量依存的に関連していた。

(a)

(b)

(a)
(a)

＜973>＜b＞＜973＞(a) ＜8222＞＜973＞(b) ＜8032＞＜9863

図3

ノニ果汁の摂取は、一酸化窒素とミエロペルオキシダーゼ活性を低下させて炎症を抑制する。 C57BL/6マウスをデキストラン硫酸ナトリウム（DSS）2.5%に暴露し、毎日ノニ果汁を摂取させた。 9日目にマウスを安楽死させ、腸の切片を採取した。 腸内の一酸化窒素生成量（a）およびミエロペルオキシダーゼ（MPO）活性を定量化し、それぞれ組織1gあたりのピコグラム／ミリリットル（pg／ml／g）および組織1gあたりの光学密度（nm／g）として表した。 データは平均±SEMで表した。 .

3.3. ノニ果汁摂取は腸内の主要炎症性サイトカインを用量依存的に減少させる

最後に、腸内構造の改善が、疾患の悪化／保護に関連する主要サイトカインの調節とも関連し得るかどうかを評価することを目指した。 ノニ果汁で処理したマウスは、使用した濃度にかかわらず、炎症性サイトカイン TNF-α および IFN-γ の産生の減少を示した (図 4 (a) および 4 (c), resp.) 。 疾患の悪化に関連する別の重要なサイトカインであるIL-17の減少は、1：10および1：100希釈液で処理したマウスにおいてのみ観察された（図4（e））。 それにもかかわらず、IL-12（図4（b））、IL-4（図4（d））、IL-23（図4（f））、およびIL-10（図4（g））の産生に差はなかった。 これらの結果を総合すると、腸管構造の改善は、主要な炎症性サイトカインの局所的な減少にも関連している可能性があることが示唆される。

(a)

(b)

(c)

(a)(b)(c)を参照。
(d)

(e)

(f)

(g)

となる。
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)

図4

ノニ果汁の摂取は、腸内の主要な炎症性サイトカインを用量に関係なく減少させる。依存的である。 C57BL/6マウスをデキストラン硫酸ナトリウム（DSS）2.5%に暴露し、ノニ果汁を毎日投与した。 腸管ホモジネートを用いて酵素結合免疫吸着測定法（ELISA）を実施した。 (a) TNF-α, (b) IL-12, (c) IFN-γ, (d) IL-17, (e) IL-23, (f) IL-4, および (g) IL-10。 結果は、組織乾燥重量で正規化した、組織1グラムあたりのミリリットルあたりのサイトカインのナノグラム（ng/ml/g of tissue）として表現された。 データは、平均±SEMとして表した。 .

4. 考察

ここに示した結果は、ノニ果汁が腸の炎症の発生に関与する主要な炎症性サイトカインを低減できることを実証している。 さらに、果汁を用いた治療は、主に1：10希釈を用いた場合に、腸の構造を改善できることも示された。

大腸炎コントロールにおけるノニ果汁を用いた治療の有益な特性は、炎症性浸潤の減少とともに腸の構造の改善に部分的に起因していました。 このシナリオは、NO（ノニ果汁を1：10および1：100で希釈した場合のみ）およびMPO（どの濃度でも）の活性の減少に続いていた。 NO は、マクロファージ、好中球、内皮細胞、平滑筋細胞などの異なる種類の細胞において、細菌性エンドトキシンや IL-1β、TNF-α、IFN-γなどの炎症性サイトカインで刺激すると、主に誘導型一酸化窒素合成酵素（iNOS）由来の強い 炎症促進メディエータである …………………………………………………………….. iNOSの過剰発現は、特に消化管などの粘膜部位において、IBDを含む炎症性疾患の発症に関連することが報告されています。 この文脈で、マクロファージ、好中球、リンパ球などの浸潤細胞や大腸上皮細胞による高濃度の NO 産生が、IBD の局所組織損傷や疾患悪化に直接関連することが報告されました . また、IBD患者や腸管炎症マウスの血漿、前庭単核細胞、大腸上皮細胞において、炎症性サイトカインIL-1βα、TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-17、IL-23によって誘導されるiNOSの過剰発現が認められ、NOなどのiNOS誘導体と炎症性サイトカインの疾患悪化・転帰における役割が強化されたことが、この観察結果を後押ししています。 従って、このような側面を調節することを目的とした治療法は、炎症や疾患の進行を抑制するための重要なツールになると考えるのが妥当であると思われます。 このような背景から、M. citrifoliaと同じルビー科に属するMorinda officinalisの根から単離されたmonotropeinは、LPSで刺激したマウスマクロファージのin vitroでのNO産生を用量依存的に減少させた。 IBD患者の血漿、尿、内腔に高濃度の亜硝酸塩/硝酸塩が存在することを記述した臨床研究において、NOとIBDの重症度の正の相関関係が提案された。 Shinらは、マウスを4％DSSに9日間連続暴露した場合にも、monotropeinの活性を実証しました。 この場合、この治療法は、炎症プレイヤーCOX-2とMPOの活性を低下させることができた 。 MPO活性の研究は、腸管粘膜の好中球の浸潤の重要なマーカーである . 実際、大腸炎を誘発するさまざまなプロトコルを用いた研究により、MPO 活性の測定と疾患の重症度との間に正の相関関係があることが示されています . 本研究では COX-2 と iNOS の発現は測定していないが、これらの結果は、ルビコン科の異なるメンバーが類似のメカニズムで炎症を調節し、DSS誘発大腸炎の進行と重症化を抑制することができることを示唆している。 マクロファージなどの異なる細胞タイプの活性を制御し、サイトカインやNOの産生を減少させることを目的とした治療法によって、主要な炎症成分を調節する能力は、NFJを用いた本研究で観察されたように、IBDにおける炎症の進行を抑制する有望なアプローチであることを表しています。

腸の炎症の発生に関連する複雑で不均一なメカニズムには、宿主の遺伝学、環境トリガー、微生物叢組成と免疫バランスの両方における障害が含まれます。 腸の炎症の重症化は、炎症性サイトカイン（例えば、TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-17、IL-23）の産生の増加と関連しており、これらのサイトカインのレベルを低下させることを目的とした治療が重要である。

TNF-α は、腸の炎症の発症における中心的な役割を果たすものの1つであり、IBD 患者の腸粘膜で増加しています。 このサイトカインは、NOの産生にも重要な役割を果たし、メタロプロテアーゼの産生を増加させ、上皮の完全性の喪失と疾患の悪化に寄与しています。 TNF-αの作用は、TNF受容体-1（TNFR-1）とTNF受容体-2（TNFR-2）という2つの受容体によって媒介される。 前者は免疫細胞、非免疫細胞のいずれにも発現し、NF-κBの活性化、細胞傷害性、炎症性サイトカインの産生をもたらす . 我々の研究では、ノニ果汁による処理は、使用した希釈度にかかわらず、腸内のTNF-αの産生をかなり減少させた。 この調節は、少なくとも部分的には、発酵ノニ果汁から分離されたアスコルビン酸とフラボノイド配糖体によるNF-κBの阻害に起因している可能性がある。 しかし、これらの分子は、TNFR-1をダウンレギュレートすることによって、腸内のTNF-αのレベルを減少させるかもしれないと推測することが可能である。 実際、IBDの発症と悪化におけるこのサイトカインの重要性から、腸の炎症の発症を防ぐためにTNF-αを標的とする治療法は有用であると考えられます。 IL-6およびTNF-αに対するモノクローナル抗体の投与は、DSS誘発大腸炎において疾患の重症度を下げ、腸の炎症を抑制することができました。 それにもかかわらず、特に抗薬物抗体の産生や薬物クリアランスの促進により、かなりの数の患者が反応性を失っており、IBDの進行をよりよく制御し、副作用を軽減することを目的とした新しい治療アプローチの必要性が強化されているのです。 IFN-γを産生するCD4+T細胞およびCD8+T細胞の頻度は、対照群と比較してIBD患者で高いことが示された。 IFN-γとTNF-αの両方がIBD患者の粘膜で増加し、相乗的に作用して、バリア破壊に至る炎症の発生と維持に寄与している。 これらのサイトカインは、不健康な組織の非炎症領域では観察されない、炎症条件下での細胞間接合タンパク質を破壊することが示されています。 これらの障害の基礎となるメカニズムには、上皮のアポトーシスやタイトジャンクションタンパク質の転写の減少などがある したがって、このサイトカインを減少させることを目的とした治療法は、炎症を制御し、疾患の転帰を改善するのに有用であると考えられる。 この文脈で、6日間黄砂にさらされたマウスに短期間グルココルチコイドを投与すると、脾臓のIFN-γ産生CD4+細胞の頻度を減らし、腸のこのサイトカインとIL-1βの発現を減少させることができた . このIFN-γ活性の低下により、臨床結果が改善され、免疫バランスが回復した。 さらに、IL-1βやIFN-γなどの炎症性サイトカインの減少に伴う有益な効果は、マウスの大腸炎モデルでさらに明らかにされた。 このモデルでは、ジニトロベンゼンスルホン酸（DNBS）の大腸内投与により大腸炎を誘発し、カンナビゲロールと呼ばれる非精神病性カンナビノイドを用いてマウスを治療した。 本研究では、ノニ果汁投与によるアポトーシスおよび腸管透過性への影響は調査されていないにもかかわらず、腸管構造の改善および炎症性浸潤の減少は、IFN-γの減少に一部起因していると考えられる。

IL-17 産生細胞は多くの炎症性および自己免疫疾患の病因に関わり、それらは IBD における疾患発症を媒介すると示されている …。 IBD の病因における Th17 細胞の役割は、主に、IBD 患者で同定された、Th17 関連サイトカインの産生を制御する IL-23R 遺伝子の変異に起因するものであった . 実際、UCとCDの両方で、層状固有細胞によるIL-17の産生が増加していることがすでに示されていた . さらに、IL-17やIL-21などのTh17細胞の産生するサイトカインは、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8の発現や好中球の動員を上昇させ、IBDの悪化に寄与している可能性があることが明らかにされています。 IBD発症におけるTh17リンパ球の古典的役割に加え、グループ3自然リンパ球も実験モデルとヒトの両方でIL-17産生と疾患発症に関与していることが示唆されている 。 我々の研究では、ノニ果汁で処理したマウスの結腸でIL-17のレベルが低下していることが検出されたが、それは1：10および1：100の希釈液を使用した場合のみであった。 腸内の IL-17 の減少が自然免疫と適応免疫のどちらに関連するのか、あるいはその両方なのかは特定できなかったが、大腸炎の炎症を抑制するためにこれらのサイトカインを産生することを目的とした治療の重要性は軽視できない。

全体として、我々のデータは、ノニ果汁による治療が実験的大腸炎発症中の炎症を抑制するのに重要な役割を果たすことを示した。 治療オプションとしてのフルーツジュースの使用に関する重要な側面の1つは、その免疫調節効果に関するものであり、その結果、腸の構造の改善に影響を及ぼします。 しかし、このモデルにおける炎症性サイトカインの減少の基礎となる分子を解明するために、さらなる研究を行う必要がある」

Competing Interests

著者は利害の衝突を宣言していない。

謝辞

本研究は、Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG), Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES), Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq, 150075/2016-2) によって支援されている(

) 。