Fluorescence recovery after photobleaching (FRAP) è una tecnica di microscopia a fluorescenza per misurare la diffusione e il trasporto molecolare. La FRAP è una tecnica preziosa nella ricerca biologica cellulare e si è evoluta insieme ai progressi del microscopio e delle sonde fluorescenti. Sebbene sia stata sviluppata negli anni ’70, la scoperta e l’ulteriore sviluppo delle proteine fluorescenti hanno rivoluzionato la FRAP. Dopo la scoperta della proteina di fluorescenza verde e la sua applicazione come una proteina-tag non invasiva e codificata geneticamente, gli studi in vivo delle dinamiche e delle interazioni delle proteine sono diventati possibili. La FRAP si basa sullo sbiancamento irreversibile di un pool di sonde fluorescenti e sul monitoraggio del recupero della fluorescenza dovuto al movimento delle sonde intatte circostanti nel punto sbiancato. Anche se le misurazioni sono semplici, la FRAP quantitativa richiede un’attenta progettazione sperimentale, controlli solidi, raccolta e analisi dei dati. Negli ultimi anni, diverse tecniche legate al FRAP sono state adattate per soddisfare particolari questioni biologiche cellulari, tra cui il FRAP inverso, la perdita di fluorescenza nel photobleaching e la localizzazione della fluorescenza dopo il photobleaching.