Jacksonova nahrávací kariéra údajně začala tím, že se v roce 1964 odvážila zúčastnit talentové soutěže v harlemském nočním klubu Smalls Paradise, kterou vyhrála. Ačkoli v roce 1970 poprvé nahrávala pro společnost MGM Records, brzy ji opustila a začala dlouhodobě spolupracovat s newyorskou společností Spring Records. Spolupracovala s Raefordem Geraldem, interním producentem tohoto vydavatelství, a jejím prvním singlem, který se dostal do hitparády, byl v roce 1971 singl s klamavým názvem „A Child of God (It’s Hard to Believe)“, který se v hitparádě R&B umístil na 22. místě. V roce 1972 měla Jacksonová svůj první singl v první desítce R&B s následující skladbou „Ask Me What You Want“, která se rovněž dostala do popové Top 30. Skladba „My Man, A Sweet Man“ se pak dostala na 7. místo R&B a na 50. místo UK Singles Chart; na všech třech písních se podílela Jacksonová. „My Man, A Sweet Man“ se skládá ze severského soulu, stejně jako její nahrávka „A House for Sale“ z roku 1976. Následující rok jí přinesl třetí americký hit v první desítce R&B, „It Hurts So Good“, který se umístil na 3. místě v hitparádě R&B a na 24. místě v americkém popovém žebříčku Billboard Hot 100. „It Hurts So Good“ se dostala do první desítky v USA. Singl se objevil na stejnojmenném albu a v blaxploitation filmu Cleopatra Jones.

V roce 1974 vydala album Caught Up, které představilo její inovativní styl chlípného mluveného slova. Představovala se na něm její verze milionového hitu Luthera Ingrama „(If Loving You Is Wrong) I Don’t Want to Be Right“, za kterou získala dvě nominace na Grammy. V té době už změnila producenta a spolupracovala pouze s Bradem Shapirem, který se podílel na písních „It Hurts So Good“ a „Love Doctor“. Pracovala ve studiu Muscle Shoals v Alabamě s proslulou Muscle Shoals Rhythm Section a nadále zde nahrávala většinu svého materiálu pro Spring, včetně následného alba „Still Caught Up“. Během následujících deseti let měla Jacksonová na kontě řadu úspěšných alb a četná umístění v hitparádě R&B, z nichž největším byla její verze country hitu Merlea Haggarda „If You’re Not Back in Love By Monday“ z roku 1977. Po tomto singlu následovala řada dalších, včetně její verze písně Boney M., diskotékového singlu „Never Change Lovers in the Middle of The Night“. Tento singl se v roce 1979 umístil na 33. místě černošského singlového žebříčku.

Jacksonová nahrála v roce 1979 album s Isaacem Hayesem nazvané „Royal Rappin’s“ a ve stejném roce vydala dvojalbum „Live And Uncensored“, nahrané na koncertě v losangeleském klubu The Roxy, a „Live and Outrageous“ v atlantském klubu Mr. V’s Figure8. Jackson také založil a produkoval skupinu Facts of Life. V roce 1976 měli velký hit s písní „Sometimes“ (#3 R&B, No. 31 Pop). Po ukončení činnosti vydavatelství Spring v roce 1984 se Jacksonová ocitla bez vydavatelství, ale v roce 1986 podepsala smlouvu s Jive Records, v jejímž rámci vznikla čtyři alba a výsledkem byly další hity v Top Ten R&B s „Hot! Wild! Unrestricted! Crazy Love“ a „Love Is a Dangerous Game“. V roce 1985 se objevila na skladbě Eltona Johna „Act Of War“, která se stala hitem Top 40 ve Velké Británii, ale v USA se do hitparád nedostala. V roce 1991 napsala, produkovala a hrála v úspěšné zájezdové hře Young Man, Older Woman, založené na jejím stejnojmenném albu pro společnost Jive. Dne 24. listopadu 1994 se Jacksonová objevila v epizodě Martina na Den díkůvzdání (Feast or Famine) v roli Florine. V roce 2000 zazněl její hlas v písni „Am I Wrong“ od Etienna de Crécyho, která byla vysamplována z jejího vystoupení v písni „(If Loving You Is Wrong) I Don’t Want to Be Right“.

Jackson se často objevuje na seznamech „nejhorších ever“ za obaly svých alb. Na obalu E.S.P. (Extra Sexual Persuasion) Jacksonová nahlíží do křišťálové koule, která zdůrazňuje její výstřih; na obalu Back to the S**t! je zobrazena Jacksonová sedící na záchodě, kde je naznačeno, že se vyprazdňuje.

Jacksonová nyní provozuje vlastní nahrávací společnost Weird Wreckuds. Po delší přestávce v nahrávání vydala v roce 2001 album Not For Church Folk, které znamenalo návrat k jejímu stylu se současným zvukem Urban. Album obsahuje singly „Butt-A-Cize“ a „Leave Me Alone“. Na albu se také objevila spolupráce s rapperem Da Bratem v písni „In My Life“. Jacksonová měla 13 let vlastní rozhlasovou show v texaském Dallasu. Vysílala dálkově ze svého domova v Atlantě ve státě Georgia a až do 6. ledna 2012 působila v odpoledním vysílacím čase od 15 do 18 hodin na stanici KKDA 730 AM.

V roce 2006 bylo pět Jacksonových nejprodávanějších alb – Millie Jackson (1972), It Hurts So Good (1973), Caught Up (1974), Still Caught Up (1975) a Feelin‘ Bitchy (1977) – digitálně remasterováno a vydáno na CD s bonusovými skladbami. Všechna Jacksonova alba z éry Spring Records jsou k dostání u Ace Records ve Velké Británii. Album An Imitation of Love bylo v roce 2013 znovu vydáno na CD u labelu Funkytowngrooves v remasterované, rozšířené edici. Další alba vydaná na značkách Jive a Ichiban zůstávají nevydána, i když některé z těchto písní se objevují na kompilačních CD. Dne 6. února 2012 byl na televizní stanici TV One odvysílán dokumentární film Unsung – The Story of Mildred ‚Millie‘ Jackson. Jackson vystoupil 3. srpna 2012 v historickém Howard Theatre ve Washingtonu a 4. srpna 2012 v B.B. King’s Blues Clubu v New Yorku. Dne 6. června 2015 byl Jackson uveden do oficiální Rhythm & Bluesové hudební síně slávy v Clarksdale ve státě Mississippi.