ネフェロメトリーは、免疫学において、いくつかの血漿タンパク質のレベルを決定するために用いられる技術である。 例えば、抗体のアイソタイプやクラスの総レベルを測定します。 また、多発性骨髄腫などの疾患における遊離軽鎖の定量化にも重要です。 定量化は、疾患の分類や治療後の疾患モニタリングに重要です(治療後にκ-λ軽鎖間の比の偏りが大きくなると、疾患再発の兆候となります)。
測定する試料からの角度で散乱光を測定することにより行われます。 診断用ネフェロメトリーでは、反応の経過を最適化することによってハイデルベルガー・ケンドール曲線の上昇枝を拡張し、ほとんどの血漿タンパク質(ヒト血液由来)の測定信号が、非常に高い濃度でもハイデルベルガー・ケンドール曲線の左辺に収まるようにしています
この技術は比較的容易に自動化できるので臨床検査室で広く使用されています。 これは、小さな粒子の希薄な懸濁液が、通過した光(通常はレーザー)を単に吸収するのではなく、散乱させるという原理に基づいている。 散乱の量は、角度(通常30度と90度)をつけて光を集めることによって決定されます。
抗体と抗原は、すぐに底に沈まない小さな凝集体だけが形成されるような濃度で混合されます。 光散乱の量を測定し、既知の混合物からの散乱量と比較します。 未知物質の量は、標準曲線から決定される。
ネフェロメトリーでは、抗原、抗体のどちらを検出することもできますが、通常は抗体を試薬として、患者抗原を未知物質として実施されます。 免疫学メディカルラボでは、2種類のテストを実行することができます。 「エンドポイントネフェロメトリー」と「キネティック(速度)ネフェロメトリー」です。
エンドポイント・ネフェロメトリーテストは、抗体/抗原反応を完了するまで(凝集できる現在の試薬抗体と現在の患者サンプル抗原のすべてがそうして、それ以上複合体を形成できなくなるまで)実行させることによって実行されます。 しかし、大きな粒子は溶液から落ち、誤った散乱の読み取りを引き起こすため、キネティック・ネフェロメトリーが考案されました。
キネティック・ネフェロメーターでは、試薬が加えられた直後に散乱の速度が測定されます。 試薬が一定である限り、変化率は存在する抗原の量に直接関係していると見なすことができます。