ブラジキニンおよび関連キニン

キニンは研究されたすべての動物種で強力な血圧降下剤である(54). これらのペプチドの最も一般的なin vivoテストは、先に述べたラットの血圧である。 キニンの血管拡張作用は、セクションIVに記載した手順に従い、内皮が無傷の単離灌流器官で測定される。 動脈血管におけるキニンの弛緩作用は，Regoli と Barabé (34) が記載した方法を用いて，犬の頸動脈 (57) において in vitro で評価される． ウサギ(1.0-2.0 kg)の静脈を幅2 mm、長さ2 cmのヘリコイド状に切り、キニンの分解を防ぐために変換酵素阻害剤 (カプトプリル、10 μM) を含むクレブス溶液 (37°C で酸素化) 中に懸濁する (34). キニンに対する組織の収縮は前述のように記録され、キニンとそのアンタゴニストの親和性を評価するために、通常完全な濃度-反応曲線が測定される。 ウサギ頸静脈はB2受容体サブタイプ(B2A)を含むことが示されている(表V)。

最もよく用いられる非血管標本はモルモット回腸で、これは250-350gのモルモットから取り、Rangに従って長手平滑筋片として準備する (37)． この組織をKrebs溶液(37℃で酸素添加)にin vitroで懸濁し、その張力の変化を単離血管の場合と同様に測定する(セクションIを参照)。 モルモット回腸はB2B受容体のサブタイプを特徴づけるために使用される調製物です（表V）。

B1 受容体は、アンジオテンシンと同じ方法で調製、処理されたウサギ大動脈片を用いて研究されています。 この組織は実験の初期にはキニン、特にBt受容体作動薬であるdesArg9BKに対してほとんど感受性がない。 数時間（最大6〜10時間）のインキュベーションの間にB1受容体がde novoに形成されるにつれて組織の感受性は増加する(55)。 キニンの収縮作用はアンギオテンシンに関してセクションIで述べたのと同じ機器と方法を用いて記録され、分析される。 ウサギの組織は、動物を殺す5時間前に静脈内に注射されるリポポリサッカライド（LPS）で前処理することにより、desArg9BKに感作することができる(56)。 LPSによるB1受容体生成のメカニズムが検討されている(60, 61)。 LPS を投与されたウサギから採取された大動脈などの組織は、in vitro での培養の初期から desArg9BK に反応する (56)。 同様に、犬の腎動脈はB1受容体を自発的に発現し、desArg9BKに高い感受性を示す(62)。

いくつかの化合物を用いて、3つの調製品の生物学的反応（収縮）を用いて、分離した器官のキニン受容体を特徴づけることが行われている（表V）。 Bradykininsとkallidinはrabbit jugular vein (RJV) とguinea pig ileum (GPI) の強力な刺激剤であるが，desArg9BK と Lys,desArg9BK は非活性である． ウサギの大動脈（RA）では逆の順序で作用し、desArg9BKはRAでのみアンタゴニストとなる。 これらの根拠に基づき、RegoliとBarabé（54）は2つのキニン受容体、B1（RA）とB2（RJV、GPI、その他多くの製剤や試験）仮説を提案し、当初は作動薬のみで特徴づけられ（54）、その後（下記参照）拮抗薬で特徴づけられるようになってきました。 B2レセプター拮抗薬はVavrekとStewartによって同定され(63)、その後様々な研究者によって、Pro3をヒドロキシプロリン（Hyp）で置換することにより、N末端にd-Argを付加することにより、Phe8をLeuで置換することにより、またジペプチドPro7-Phe8をd-チック-オリンピック（67-69）で置換することにより改良されてきた（64-66). 各アンタゴニストシリーズのプロトタイプを表Vに報告すると、5位と9位にb-2-チエニル-エラニン（Thi）は必要ないが、Hyp3とd-Arg0は特にRJVへの親和性に重要であることが示された。 Phe8をLeuに置換したd-ArgBKは，他の修飾に加え，（a）ほとんどアゴニスト活性がなく，（b）RJVに活性があり，GPIにはあまり活性がなく，RA（B1）にはやや劣り，したがってB2部位にかなり選択的である． RJVとGPIのpA2値の差（2log単位）は、B2受容体をB2A（RJV）とB2B（GPI）に細分化する提案（表V）の決定打となる所見であった。 D-ArgBKは競合的アンタゴニストであり、in vivoとin vitroの両方で急速に可逆的であり、非競合的（非平衡）であるHoe 140とは異なり、おそらくB2AおよびB2Bの両方の部位と長く相互作用するためである（59, 67, 68, 70）。 B2AとB2Bの区別は、3位の残基が異なる最後の2つの化合物（表V）で得られた結果によって裏付けられている。 Hypの存在はB2Aではアンタゴニスト（pA2 7.6）、B2Bでは部分アゴニストとして作用し、Tyr3はB2Aでは強力なアゴニスト、B2Bではかなり優れたアンタゴニスト（pure antagonist）として作用することがわかった。 この新しい分類は総説で発表されている(71)。 従って、キニンの機能部位はBとB2（2つのサブタイプが考えられている）である。 いくつかの他の受容体（B3、B4、B5）が提案されていますが（72-74）、それらの存在は確かな実験データによって証明されていません（文献59の批判的なレビューを参照）。 ラット腹膜乳腺細胞からのキニンによるヒスタミン放出は、キニンのカチオン性に起因する非特異的な現象である(75, 76).

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