StructureEdit
レビウイルスビリオンの模式図(断面と側面)
MS2ビリオン(ウイルス粒子)は電子顕微鏡で見ると直径約27 nmの大きさであることがわかります。 成熟タンパク質1コピーとコートタンパク質180コピー(90個の二量体として組織化)からなり、三角形分割数T=3の正20面体の殻を形成し、内部のゲノムRNAを保護している。 ビリオンの等電点(pI)は3.9である。
コートタンパク質の構造は、5本鎖のβシートと2本のαヘリックスおよびヘアピンで構成されており、この5本のβシートの間に1本のαヘリックスが存在する。 カプシドが組み立てられると、ヘリックスとヘアピンは粒子の外側を向き、β-シートは内側を向く。
GenomeEdit
Escherichia virus MS2 genome
Gene | Size | 遺伝子産物 | aa |
---|---|---|---|
mat
(MS2g1) |
1487 nt | maturation
protein |
|
cp
(MS2g2) |
510 nt | coat protein | 130 |
lys
(MS2g3)(注1)。 |
295 nt | lysis protein | 75 |
rep
(MS2g4) |
2055 nt | RNA replicase,
β サブユニット |
545 |
MS2ゲノムは、3569塩基の一本鎖RNAからなり、最も小さいものの1つであることが知られています。 成熟タンパク質(A-protein)、溶解タンパク質、コートタンパク質、レプリカーゼタンパク質の4つのタンパク質がコードされているのみである。 溶菌タンパク質をコードする遺伝子(lys)は、上流遺伝子(cp)の3’末端と下流遺伝子(rep)の5’末端の両方に重なっており、重複遺伝子の最初の例として知られている。 正鎖RNAゲノムはメッセンジャーRNAとして機能し、宿主細胞内でウイルスがアンコーティングされる際に翻訳される。 これらのタンパク質の発現は、翻訳とRNA二次構造の間の複雑な相互作用によって制御される。
ライフサイクル編集
MS2 は、細胞が細菌の抱合においてDNAドナーとして機能するためのプラスミドである不妊(F)因子を持つ腸内細菌に感染します。 Fプラスミド上の遺伝子は、ウイルス受容体として機能するFピルスの産生につながる。 MS2は、単一の成熟タンパク質を介して、ピルスの側面に付着する。 ファージRNAが細菌に侵入する正確なメカニズムは不明である。
ウイルスRNAが細胞に侵入すると、ファージ蛋白質を生産するためのメッセンジャーRNAとして機能し始める。 最も豊富なタンパク質であるコートタンパク質の遺伝子はすぐに翻訳できる。 レプリカーゼ遺伝子の翻訳開始点は通常RNA二次構造の中に隠されているが、リボソームがコートタンパク質遺伝子を通過する際に一過性に開かれることがある。 コートタンパク質の二量体がRNAの「オペレーターヘアピン」に結合して安定化し、レプリカーゼの翻訳開始をブロックする。 成熟タンパク質遺伝子の開始点は、複製中のRNAにはアクセスできるが、完成したMS2 RNAではRNA二次構造の中に隠されている。このため、RNAあたりごく少数の成熟タンパク質のコピーしか翻訳されない。 最後に、溶菌タンパク質遺伝子は、コートタンパク質遺伝子の翻訳を完了したリボソームによってのみ開始され、約5%の頻度で溶菌タンパク質遺伝子の開始点に「滑り戻る」ことが可能である。
バクテリオファージMS2のライフサイクル
プラス鎖のMS2ゲノムを複製するには、相補鎖のマイナス鎖RNAを合成することが必要であり、これは新しいプラス鎖RNAを合成するためのテンプレートとして使うことができる。 MS2複製は、高度に関連したバクテリオファージQβの複製に比べてあまり研究されてこなかったが、その理由の一つはMS2複製酵素の単離が困難であったためであるが、おそらく類似していると考えられる。 RNAがなくてもコートタンパク質から正20面体の殻やカプシドが組み立てられるが、カプシドの組み立てはコートタンパク質2量体がオペレーターヘアピンに結合することによって核形成され、MS2 RNAが存在するとコートタンパク質の濃度がかなり低くても組み立てられる<3348><7197>細菌の溶解と新しくできたビリオンは溶解タンパク質が十分に蓄積すると放出が行われる。 溶解(Lysis)タンパク質は細胞質膜に孔を形成し、膜電位の喪失と細胞壁の破壊をもたらす。 溶菌タンパク質は、重要なP330残基を介してDnaJと結合することが知られている。 Lタンパク質上のLSジペプチドモチーフはレビウイルス属全体に存在し、溶解活性に必須であると考えられるが、その位置が異なることから、それぞれ独立して進化してきたと考えられる
。