Solubiologiassa mikrosomit ovat heterogeenisiä vesikkelin kaltaisia artefakteja (~20-200 nm halkaisijaltaan), jotka muodostuvat uudelleen endoplasmisen retikulumin (ER) palasista, kun eukaryoottisoluja hajotetaan laboratoriossa; mikrosomeja ei esiinny terveissä, elävissä soluissa.

Mikrosomeja voidaan konsentroida ja erottaa muusta solujätteestä differentiaalisella sentrifugoinnilla. Rikkoutumattomat solut, tumat ja mitokondriot sedimentoituvat 10 000 g:n voimalla, kun taas liukoiset entsyymit ja fragmentoitunut ER, joka sisältää sytokromi P450:tä (CYP), jäävät liuokseen (g on Maan painovoiman kiihtyvyys). 100 000 g:ssa, joka saavutetaan nopeammalla sentrifugin pyörimisellä, ER sedimentoituu liuoksesta pelletiksi, mutta liukoiset entsyymit jäävät supernatanttiin. Näin mikrosomeissa oleva sytokromi P450 konsentroidaan ja eristetään. Mikrosomien väri on punaruskea, mikä johtuu hemin läsnäolosta. Koska tarvitaan moniosainen proteiinijärjestelmä, mikrosomit ovat välttämättömiä CYP:ien metabolisen aktiivisuuden analysoimiseksi. Näitä CYP:itä esiintyy runsaasti rottien, hiirten ja ihmisten maksassa, mutta niitä on myös kaikissa muissa elimissä ja organismeissa.

Jotta saataisiin mikrosomeja, jotka sisältävät tiettyä CYP:tä tai suuria määriä aktiivista entsyymiä, mikrosomeja valmistetaan Sf9-hyönteissoluista tai hiivasta heterologisen ilmentymisen avulla. Vaihtoehtoisesti voidaan myös ekspressoida kokonaisia tai typistettyjä proteiineja Escherichia coli -bakteerissa. Näin ollen mikrosomit ovat arvokas väline yhdisteiden metabolian tutkimiseen (entsyymi-inhibitio, puhdistuma ja metaboliittien tunnistaminen) sekä lääkeaineiden ja lääkkeiden välisten vuorovaikutusten tutkimiseen in vitro -tutkimuksessa. Tutkijat valitsevat mikrosomeja usein tiettyjen CYP:ien entsyymiaktiivisuustasojen perusteella. Joitakin eriä on saatavilla tiettyjen populaatioiden tutkimiseen (esim. keuhkomikrosomit tupakoitsijoilta tai tupakoimattomilta) tai ne on jaettu luokituksiin CYP:ien tavoiteaktiivisuustasojen täyttämiseksi inhibitio- ja metaboliatutkimuksia varten.

Tutkijat käyttävät mikrosomeja jäljitelläkseen endoplasmisen retikulumin toimintaa koeputkessa ja suorittaakseen kokeita, jotka edellyttävät proteiinisynteesiä membraanilla.

Tutkijoilla on mahdollisuus saada selville se, miten ER:ssä valmistetaan valkuaisaineita solussa, rekonstruoimalla prosessin koeputkella.

Vastaa

Sähköpostiosoitettasi ei julkaista.