La genotoxicidad se refiere a la capacidad de una sustancia para dañar la información genética de las células (cambios en la estructura, la secuencia y/o el número de genes), lo que puede tener efectos directos o indirectos, como la inducción de mutaciones o la activación o inactivación de genes. Normalmente se activan las vías de reparación del ADN o de apoptosis para reparar o controlar el daño; sin embargo, si el daño es fijo, puede producirse mutagénesis e incluso cáncer. Muchas veces los cambios son permanentes y heredables, por lo que pueden afectar tanto a las células somáticas como a las germinales, que se transmitirán a las generaciones futuras. De la definición se desprende que todos los mutágenos tienen genotoxicidad, pero los compuestos genotóxicos no son necesariamente mutagénicos. La genotoxicidad afecta a la salud de los pacientes e incluso de sus bebés, por lo que es un aspecto importante a tener en cuenta durante la habilitación del IND. Además, los ensayos de genotoxicidad son también pruebas in vitro habituales para predecir la carcinogenicidad. Creative Biolabs ha desarrollado varios enfoques para la estimación de la genotoxicidad de los candidatos a fármacos y para ayudar a los clientes a recopilar información para la habilitación del IND.
El objetivo de las pruebas de genotoxicidad es determinar si un candidato a fármaco dañará los materiales genéticos de las células y causará cáncer. En estas pruebas, tras la exposición al compuesto, se miden los daños en el ADN (por ejemplo, mutaciones puntuales, rotura de hebras, reticulación, aberraciones cromosómicas estructurales y/o numéricas y pérdida de la reparación por escisión) en las células. Hay una variedad de pruebas de genotoxicidad que pueden realizarse en células bacterianas, de levadura y de mamífero. La prueba de Ames y el ensayo de mutación inversa de Escherichia coli son dos métodos de prueba de mutagenicidad in vitro basados en células bacterianas, mientras que la prueba de aberración cromosómica en mamíferos y la prueba de mutación genética en células de mamíferos se basan en células de mamíferos. El ensayo de Ames y el ensayo del cometa son dos de los métodos más populares utilizados para evaluar el potencial de las sustancias químicas para causar daños en el ADN y cáncer.
El ensayo de Ames (ensayo de mutación inversa bacteriana)
El ensayo de Ames emplea cepas de bacterias mutantes auxotróficas que requieren histidina del entorno para su crecimiento. En el ensayo de Ames, si la sustancia analizada es capaz de crear mutaciones (genotóxicas) que dan lugar a un estado prototrófico de las cepas, las células deben tener un crecimiento normal de en un medio sin histidina.
Figura 1. Ensayo de Ames.
El ensayo de Comet (ensayo de electroforesis en gel de una célula)
El ensayo de Comet es uno de los ensayos de genotoxicidad más comunes. Las células se lisan con detergentes y sales y el ADN liberado pasa por electroforesis en gel de agarosa en condiciones de pH casi neutro. Cuantas más roturas de doble cadena contenga una célula, más rápido migrará el ADN hacia el ánodo. Esta técnica es bastante sensible para detectar daños en el ADN, fácil y barata de realizar, y rápida para obtener los resultados de la prueba.
Otras pruebas de toxicología in vitro e in vivo, como el ensayo TK+/- del linfoma de ratón, el ensayo SOS/umu y la prueba de micronúcleos in vitro e in vivo, también se utilizan para determinar la genotoxicidad de los compuestos.
Creative Biolabs también ofrece otros servicios de descubrimiento de fármacos. Para obtener información más detallada, no dude en ponerse en contacto con nosotros o enviarnos directamente una consulta.
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