Abstract

Baggrund. Mucopolysaccharidpolysulfat (MPS) har været anvendt i medicin som et antiinflammatorisk og antitrombotisk middel i over 50 år. Dets kemiske struktur giver mulighed for betydelig hydrogenbinding med tilstødende vandmolekyler, hvilket effektivt fører til hydrering af det omgivende væv. Desuden stimulerer det den endogene hyaluronatsyntese, hvilket resulterer i en forøgelse af hudens vandbindende evne og viskoelasticitet. Formål. At undersøge virkningen af 0,1 % MPS på hydrering og elasticitet af menneskelig hud. Metoder. Første del af denne undersøgelse var en randomiseret dobbeltblind placebokontrolleret undersøgelse, som omfattede 60 kvindelige frivillige i alderen 30-45 år med tør hud, defineret ved hjælp af Corneometer CM 825. De frivillige blev behandlet med enten 0,1 % MPS eller kontrol med vehikel. Alle forsøgspersoner blev bedt om at påføre 1 g creme i ansigtet to gange dagligt i en periode på i alt 4 uger. Hudens hydrering og elasticitet blev målt ved baseline og i uge 4 med Corneometer CM 825 og cutometer MPA 580 på henholdsvis panden og begge kinder. Anden del af denne undersøgelse fokuserede på virkningen af 0,1 % MPS på hudens hydrering efter en enkelt påføring. 20 kvindelige frivillige i alderen 30-45 år med tør hud, defineret ved hjælp af Corneometer CM 825, blev rekrutteret til undersøgelsen. Alle forsøgspersoner blev bedt om at påføre 2 g 0,1 % MPS-creme på en helt tilfældigt udvalgt underarm. Hudens hydrering midt på begge underarme blev målt ved baseline, umiddelbart efter påføring og hver 1. time efter påføring i en periode på 10 timer. Resultater. 57 forsøgspersoner (28 i kontrolgruppen med vehikel, 29 i MPS-gruppen) gennemførte behandlingsprotokollen. Baselinehydrering af huden i begge grupper var ikke signifikant forskellig (). Hower, der var en statistisk signifikant forskel i hudens hydrering efter 4 uger mellem MPS- og placebogruppen (). Hudens elasticitet var signifikant forbedret ved uge 4 i begge grupper (vehicle-kontrol, , og MPS, ). Der blev dog ikke konstateret nogen signifikant forskel i hudens elasticitet mellem MPS- og vehicle-kontrolgruppen (). Endelig var der en statistisk signifikant forbedring af hudens hydrering efter en enkelt påføring (). Denne forbedring blev opretholdt i 10 timer. Konklusioner. MPS gav en forbedring af hudens hydrering, men ikke af hudens elasticitet hos kvinder med tør hud, sammenlignet med kontrol med vehikel. Og MPS forbedrede hudens hydrering i mindst 10 timer efter en enkelt påføring.

1. Introduktion

Karakteristika ved hudens aldring omfatter atrofi af dermis på grund af tab af kollagen, degeneration af det elastiske fibernetværk og tab af hydrering af epidermis . Sværhedsgraden af tør hud øges med alderen. Desuden er tør hud eller xerose forbundet med aldersuafhængige molekylære ændringer, herunder epidermal ekspression af basale og differentieringsrelaterede keratiner samt for tidlig ekspression af det kornet omslagsprotein, involucrin .

Mucopolysaccharidpolysulfat (MPS), en naturligt forekommende organoheparinoidforbindelse, er blevet anvendt i medicin i over 50 år som et antiinflammatorisk og antitrombotisk middel til behandling af en lang række tilstande, herunder slidgigt, tromboflebitis og til tromboembolismeprofylakse . Hudpermeabilitet af MPS er blevet påvist ved opnåelse af terapeutiske systemiske virkninger, herunder forebyggelse og behandling af lokale symptomer i forbindelse med perifere vaskulære lidelser, efter topisk administration .

Strukturelt set består MPS af lange uforgrenede polysaccharider med gentagne disaccharid-enheder. Den kemiske struktur muliggør en betydelig hydrogenbinding med tilstødende vandmolekyler, hvilket effektivt fører til hydrering af det omgivende væv gennem dets vandbindingsevne . Desuden har det vist sig, at MPS øger hydreringen ved at stimulere den endogene hyaluronatsyntese, hvilket fører til en forøgelse af hudens vandbindingsevne og viskoelasticitet . MPS kan mindske for tidlig ældning ved at hæmme hudnedbrydende enzymer, herunder elastase og hyaluronidase, og øge RNA-niveauerne af vigtige ekstracellulære matrixmolekyler, herunder glykosaminoglykaner og proteoglykaner .

Sigtet med denne undersøgelse var at foretage en kvantitativ vurdering af virkningen af 0.1% MPS på hydrering og elasticitet af menneskelig hud.

2. Materiale og metoder

Vi gennemførte en randomiseret dobbeltblind placebokontrolleret undersøgelse for at afgøre, om der blev opnået en målbar klinisk effekt på hudens hydrering og/eller elasticitet efter påføring af en 0,1% MPS-holdig creme (Hirudoid mild creme, OLIC (Thailand), Ltd., Thailand). Denne undersøgelse var opdelt i 2 dele.

Den første del var designet til at undersøge virkningen af 0,1 % MPS på hydrering og elasticitet af menneskelig hud. 60 thailandske kvinder mellem 30 og 45 år blev rekrutteret til denne del af undersøgelsen. Deltagerne blev udvalgt blandt personer, der reagerede på en opslået annonce på det universitetshospital, der er tilknyttet denne undersøgelse. Respondenterne blev udvalgt til at deltage, hvis de opfyldte følgende kriterier: ikke-sygdom i ansigtshuden, som bekræftet af investigatorerne; tør hudtilstand, defineret ved aflæsning af Corneometer CM825 (Courage-Khazaka, Koln, Tyskland) på 60 eller mindre; indvilligede i at gennemgå en “udvaskningsperiode” på en måned, hvor ingen aktuel medicinsk behandling måtte anvendes i ansigtet, og hvor ingen systemisk behandling, der vides at påvirke huden, måtte tages; følgende indvilligede i at overholde hele undersøgelsesprotokollen. Eksklusionskriterierne omfattede: manglende evne til at give informeret samtykke, syg ansigtshud, normal hudhydrering defineret ved en Corneometer CM825-måling på over 60, manglende evne til at gennemgå “vaskeperioden” eller manglende evne til at overholde undersøgelsesprotokollen. Der blev indhentet skriftligt informeret samtykke fra hver deltager.

Alle frivillige med bekræftet tør hud (Corneometer-værdi ≤ 60) blev randomiseret til 2 separate undersøgelsesgrupper til påføring af enten en 0,1 % MPS-holdig creme eller en MPS-fri cremebase som vehiclecontrol to gange dagligt i fire uger. Hudens hydrering og elasticitet blev målt ved baseline og uge 4 med corneometer CM 825 og Cutometer MPA 580 (Courage-Khazaka, Koln, Tyskland) på henholdsvis panden og begge kinder.

I løbet af den 4-ugers undersøgelsesperiode var det forbudt at anvende fugtighedscreme, toner, foundation, samtidig medicinering eller aktuel behandling af enhver art på behandlingsstedet for studielægemidlerne. Kun brugen af det medfølgende rensemiddel (Cetaphil gentle skin cleanser, Galderma Laboratories, L.P., USA) var tilladt. De frivillige fik 60 g pr. forsøgsperson af enten MPS-holdig creme eller kontrolcreme med medium. Kontrolcremen bestod af mineralolieglycerin, emulgator, renset vand og flydende paraffin. Disse to typer aktuelle behandlinger var i identisk emballage, således at hverken den frivillige eller forsøgslederen vidste, hvilken type behandling der blev givet. De frivillige blev instrueret om at påføre ca. 1 g af undersøgelsescremen over hele ansigtet, idet de undgik det periorbitale område, 2 gange dagligt morgen og aften efter rensning af ansigtet i 28 dage. De frivillige blev instrueret om at skylle øjnene med vandhanevand, hvis der ved et uheld kom creme i øjnene.

Målinger af hudens hydrering og elasticitet blev foretaget ved baseline og derefter umiddelbart efter 4-ugers perioden på panden og begge kinder af to blinde investigatorer. Hydratationsværdien (opnået ved hjælp af corneometersonden) blev gradueret på en værdi i arbitrære enheder fra 0 til 130 (for ansigtshud: 0-<50, meget tør; 50-60, tør, og >60, tilstrækkelig fugtet). Elasticitetsværdien blev opnået ved hjælp af Cutometer-sonden. Resultatet blev præsenteret i 10 forskellige værdier (R0-R9). Værdien R5 afspejler hudens elasticitet. Alle målinger blev målt i et temperatur- og fugtighedskontrolleret rum med en temperatur på 25 °C og en luftfugtighed på 60 %.

Den anden del af denne undersøgelse havde til formål at undersøge virkningen af 0,1 % MPS (Hirudoid mild creme, OLIC (Thailand), Ltd., Thailand) på hudens hydrering efter enkelt påføring. Vi gennemførte en randomiseret dobbeltblind placebokontrolleret undersøgelse ved at rekruttere 20 kvindelige frivillige i alderen 30-45 år med tør hud, defineret ved hjælp af corneometer CM 825 (Courage-Khazaka, Koln, Tyskland). Alle forsøgspersoner blev bedt om at påføre 2 g 0,1 % MPS-creme på en helt tilfældigt udvalgt volar underarm. Hudens hydrering midt på begge volare underarme blev målt ved baseline, umiddelbart efter påføring og hver 1. time efter påføring i en periode på 10 timer. Alle målinger blev målt i et temperatur- og fugtighedskontrolleret rum med en temperatur på 25 °C og en luftfugtighed på 60 %.

Denne undersøgelse blev godkendt af den etiske komité for forskning med menneskelige forsøgspersoner, det medicinske fakultet, Siriraj Hospital, Mahidol University, og var i overensstemmelse med retningslinjerne i Helsingfors-erklæringen fra 1975. Der blev indhentet skriftligt informeret samtykke fra alle forsøgspersoner.

2.1. Statistisk analyse

Der blev anvendt uparret t-test til at sammenligne baselineværdierne for hydrering og elasticitet mellem undersøgelses- og kontrolgruppen. Der blev anvendt parret t-test til at sammenligne baselinehydrering og elasticitet med de værdier, der blev opnået efter den 4-ugers prøveperiode med creme. Der blev anvendt gentagen analyse af varians (ANOVA) test til at sammenligne hudens hydrering mellem begge volare underarme hos hver forsøgsperson ved baseline, umiddelbart efter påføring og hver 1 time efter påføring i en periode på 10 timer. Bonferroni posttest blev også anvendt til at sammenligne hudens hydrering mellem hvert af tidsintervallerne. Alle statistiske analyser blev udført ved hjælp af SPSS-software, version 16.0.

3. Resultater

For den første del af undersøgelsen gennemførte 57 ud af de oprindelige 60 frivillige (29 MPS, 28 kontrol; gennemsnitsalder 36 år i begge grupper) de 4 uger af undersøgelsesprotokollen. De gennemsnitlige baselineværdier for hudens hydrering i MPS- og vehicle-kontrolgruppen var 49,04 (±5,80) og 47,86 (±6,74) . Den gennemsnitlige baselineværdi for hudens elasticitet (R5) i MPS- og kontrolgruppen var 54,24 og 54,95 .

Statistisk analyse af hudens hydreringsværdier som målt med corneometeret ved baseline og efter den 4-ugers undersøgelsesperiode en statistisk signifikant forbedring af hydreringen i begge grupper (figur 1(a) og 1(b)). Desuden blev der fundet en statistisk signifikant forskel i graden af forbedring af hydrering ved sammenligning af størrelsen af stigningen i hydrering mellem kontrol- og undersøgelsesgruppen .

(a)

(b)

(a)
(b)

Og selv om Cutometeret ved aflæsning viste en statistisk signifikant forbedring af elasticiteten blandt begge grupper efter 4-ugers perioden (figur 2), blev der ikke fundet nogen statistisk signifikant forskel i graden af forbedring af elasticiteten mellem kontrol- og undersøgelsesgrupperne .

Figur 2

Ingen signifikant forskel i hudens elasticitet mellem de to grupper .

Ingen af de frivillige rapporterede nogen bivirkninger til enten kontrol- eller undersøgelsesbehandlingen i hele undersøgelsesperioden.

I anden del af undersøgelsen gennemførte alle 20 forsøgspersoner de 10 timer af undersøgelsesprotokollen. Statistisk analyse verificerede, at patienternes alder, rumtemperatur og luftfugtighed ikke var signifikant forskellige i løbet af 10 timers undersøgelsesperiode. Gennemsnitsalderen for forsøgspersonerne var 33,0 år . Rumtemperaturen og luftfugtigheden var indstillet til henholdsvis 24,33 °C og 60,82 % . De gennemsnitlige baselineværdier for hudens hydrering i MPS- og kontrolsiden var henholdsvis 41,87 og 40,68 . Statistisk analyse af hudens hydreringsværdier som målt med corneometeret viste, at der ikke var nogen signifikante forskelle i hudens hydrering mellem MPS- og kontrolsiden før behandlingen . Hudhydrering på MPS-siden blev dog forbedret betydeligt umiddelbart efter påføring, og denne forbedring blev opretholdt i 10 timer efter en enkelt påføring (figur 3). Ingen af de frivillige rapporterede nogen bivirkninger til MPS i hele undersøgelsesperioden.

Figur 3

Hudhydrering på MPS-siden blev opretholdt i 10 timer efter enkelt påføring.

4. Diskussion

Mukopolysaccharidpolysulphat i MPS-creme ligner kroppens egne mucopolysaccharider. De farmakologiske egenskaber ved topisk påført MPS korrelerer godt med de dokumenterede kliniske virkninger . I første del af undersøgelsen viste vi, at påføring af MPS to gange dagligt over en 4-ugers periode resulterede i en betydelig forbedring af hudens hydrering sammenlignet med tilsvarende påføring af kontrolcreme. Vores resultater kan forklares ved at tage hensyn til den kemiske struktur af MPS, et glykosaminoglykaner (GAG’er) derivat, som har rigelige hydroxylgrupper og let danner hydrogenbindinger med tilstødende vandmolekyler. Forbindelsen af vand med MPS-molekyler forhindrer fordampning af vand, hvilket resulterer i nedsat udtørring af den omgivende hud.

Fundet af, at konsekvent anvendelse af MPS forbedrer hudens hydrering, er et vigtigt resultat, da nedsat hudens hydrering er forbundet med adskillige hudtilstande, herunder kutan fotoældning og xerose. Kutan fotoforældning korrelerer med fokal aflejring af GAG’er i den midterste og dybe dermis sammenlignet med den diffuse fordeling af GAG’er, der findes i sund solbeskyttet dermis, hvor disse makromolekyler findes gennem dermis mellem kollagenbundter . Selv om solskadet hud indeholder øgede mængder af glykosaminoglykaner, er det muligt, at disse molekyler ikke kan fungere på samme måde som i solbeskyttet hud på grund af ændringer i de elastotiske materialer. Som en type glykosaminoglykan kan aktuel anvendelse af MPS give en mere jævn fordeling af GAG’er svarende til fordelingen i sund ikke-UV-skadet dermis. Disse jævnt fordelte GAG’er kan så tjene til at fremme hydrering og hjælpe med bevægelsen af næringsstoffer og cellulære metabolitter.

Xerose, der klinisk er karakteriseret ved kløende, tør, revnet og sprækket hud med skældannelse, er i stigende grad almindelig blandt ældre, fordi ældre personer har nedsat aktivitet i talg- og svedkirtlerne . De revner og sprækker, der karakteriserer denne tilstand, skyldes epidermisk vandtab, og derfor kan denne tilstand forbedres ved brug af MPS.

Dermal absorption af MPS hos mennesker blev undersøgt in vitro. Resultaterne viste, at MPS trængte ind i huden og var i stand til at nå de dermale lag i effektive koncentrationer . Absorptionen af MPS til det systemiske kredsløb var imidlertid for lav til at påvirke blodkoagulationen . Dette kunne fortolkes således, at MPS kan blive “fanget” i dermis, hvilket kan føre til øget vandophobning i epidermis. Da MPS omfatter organoheparinoidforbindelser, hyaluronsyre, glykosaminoglykaner osv. Hudens hydrering kan forbedres ved at øge indholdet af hyaluronsyre og glykosaminoglykaner.

Notatvis var der en statistisk signifikant forbedring af elasticiteten i begge grupper, når man sammenlignede baseline til efter den 4-ugers periode med anvendelse af enten cremebasen eller den MPS-holdige creme. Anvendelse af MPS resulterede imidlertid ikke i en signifikant forbedring af hudens elasticitet sammenlignet med kontrolcremebasen, hvilket indikerer, at den fysiologiske virkning af MPS på huden ikke indebærer en stigning i kollagenproduktionen, der er tilstrækkelig stor til at resultere i en klinisk påviselig forbedring af hudens elasticitet. Derfor kan de andre ingredienser i cremebasen, f.eks. glycerin og flydende paraffin , være ansvarlige for forbedringen af hudens elasticitet i begge grupper.

I anden del af denne undersøgelse viste vi, at en enkelt påføring af MPS resulterede i en signifikant forbedring af hudens hydrering i mindst 10 sammenhængende timer sammenlignet med en tilsvarende påføring af kontrolcremebasen. Resultaterne af denne undersøgelse indikerede, at MPS kan tjene som en gavnlig terapi i behandlingen af xerose den konstatering, at MPS påvirkede, kan forklares ved at tage hensyn til den kemiske struktur af MPS. MPS, et glykosaminoglykaner (GAG’er) derivat, har rigelige hydroxylgrupper, som let danner hydrogenbindinger med tilstødende vandmolekyler . Forbindelsen af vand med MPS-molekyler forhindrer fordampning af vand, hvilket resulterer i nedsat udtørring af den omgivende hud.

5. Konklusioner

Sammenfattende viste denne undersøgelse, at MPS gav en forbedring af hudens hydrering, men ikke af hudens elasticitet hos kvinder med tør hud, sammenlignet med kontrol med vehikel. MPS kunne også forbedre hydrering menneskets hud i mindst 10 timer efter enkelt påføring. Fremtidige undersøgelsesovervejelser bør omfatte evaluering af effekten af MPS på specifikke xerotiske hudtilstande samt bestemmelse af optimale MPS-koncentrationer til behandling af en sådan tilstand.

Autors bidrag

Dr. W. Manuskiatti havde fuld adgang til alle data i undersøgelsen og tager ansvar for integriteten af data og nøjagtigheden af dataanalysen. Undersøgelsens koncept og design: Drs. R. Wanitphakdeedecha og W. Manuskiatti: Dataindsamling: Drs. R. Wanitphakdeedecha og W. Manuskiatti. Analyse og fortolkning af data: Drs. R. Wanitphakdeedecha og W. Manuskiatti. Udarbejdelse af manuskriptet: Dr. S. Eimpunth. Kritisk revision af artiklen for vigtigt intellektuelt indhold: Dr. W. Manuskiatti. Statistisk analyse: Dr. R. Wanitphakdeedecha. Tilvejebragt finansiering: ingen. Administrativ, teknisk eller materiel støtte: Dr. W. Manuskiatti. Tilsyn med undersøgelsen: Dr. W. Manuskiatti.