Nefelometri er en teknik, der anvendes inden for immunologi til at bestemme niveauet af flere blodplasmaproteiner. F.eks. de samlede niveauer af antistoffer isotyper eller klasser: Immunoglobulin M, Immunoglobulin G og Immunoglobulin A. Den er vigtig ved kvantificering af frie lyskæder ved sygdomme som f.eks. multipel myelom. Kvantificering er vigtig for sygdomsklassificering og for sygdomsovervågning, når en patient er blevet behandlet (øget skævhed i forholdet mellem kappa- og lambda-lyskæderne, efter at en patient er blevet behandlet, er en indikation på sygdomsrecidiv).

Det udføres ved at måle det spredte lys i en vinkel fra den prøve, der måles. Ved diagnostisk nefelometri udvides den opadgående gren af Heidelberger-Kendall-kurven ved at optimere reaktionsforløbet, således at de fleste plasmaproteiner’ (fra humant blod) målesignaler falder på venstre side af Heidelberger-Kendall-kurven, selv ved meget høje koncentrationer.

Denne teknik anvendes i vid udstrækning i kliniske laboratorier, fordi den er relativt let automatiserbar. Den er baseret på princippet om, at en fortyndet suspension af små partikler vil sprede lys (normalt en laser), der føres igennem den, i stedet for blot at absorbere det. Størrelsen af spredningen bestemmes ved at opsamle lyset i en vinkel (normalt 30 og 90 grader).

Antistoffet og antigenet blandes i sådanne koncentrationer, at der kun dannes små aggregater, som ikke hurtigt falder til bunds. Mængden af lysspredning måles og sammenlignes med mængden af spredning fra kendte blandinger. Mængden af det ukendte stof bestemmes ud fra en standardkurve.

Nephelometri kan bruges til at påvise enten antigen eller antistof, men den udføres normalt med antistof som reagens og patientens antigen som den ukendte. I det immunologiske medicinske laboratorium kan der udføres to typer test: “endepunktsnefelometri” og “kinetisk (hastighed) nefelometri”.

Endpunkts nefelometri-tests udføres ved at lade antistof/antigen-reaktionen køre til ende (indtil alle de tilstedeværende reagensantistoffer og de tilstedeværende antigener fra patientprøven, der kan aggregeres, har gjort det, og der ikke længere kan dannes komplekser). Imidlertid vil de store partikler falde ud af opløsningen og forårsage en falsk måling af spredningen, og derfor blev kinetisk nefelometri udtænkt.

I kinetisk nefelometri måles spredningshastigheden lige efter, at reagenset er tilsat. Så længe reagenset er konstant, kan ændringshastigheden ses som direkte relateret til mængden af tilstedeværende antigen.