Jacksons pladekarriere startede efter sigende med en udfordring i 1964, da hun i 1964 deltog i en talentkonkurrence på natklubben Smalls Paradise i Harlem, som hun vandt. Selv om hun først indspillede for MGM Records i 1970, forlod hun det hurtigt og indledte en langvarig samarbejde med New York-baserede Spring Records. Hun arbejdede med selskabets interne producer, Raeford Gerald, og hendes første single, der kom på hitlisten, var 1971’s vildledende titel “A Child of God (It’s Hard to Believe)”, som nåede nummer 22 på R3117>B-listen. I 1972 fik Jackson sin første R&B Top Ten-single med opfølgeren “Ask Me What You Want”, som også nåede pop Top 30, og derefter nåede “My Man, A Sweet Man” nr. 7 på R&B og 50 på UK Singles Chart; alle tre sange var medskrevet af Jackson. “My Man, A Sweet Man” består af nordisk soul, ligesom hendes indspilning “A House for Sale” fra 1976. Året efter fik hun sit tredje amerikanske R&B top ti-hit, “It Hurts So Good”, som blev nr. 3 på R&B-listerne og nr. 24 på US Billboard Hot 100 poplisten. Singlen var med på albummet af samme navn og i blaxploitationfilmen Cleopatra Jones.

I 1974 udgav hun albummet Caught Up, som introducerede hendes nyskabende stil med ubehagelige talte ord. Den fremhævede udgivelse var hendes version af Luther Ingrams millionsælger, “(If Loving You Is Wrong) I Don’t Want to Be Right”, som hun modtog to Grammy-nomineringer for. Hun havde nu skiftet producer og arbejdede kun med Brad Shapiro, som havde været involveret i “It Hurts So Good” og “Love Doctor”. Hun arbejdede i Muscle Shoals Studio i Alabama med den berømte Muscle Shoals Rhythm Section og fortsatte med at indspille det meste af sit materiale til Spring der, herunder opfølgningsalbummet “Still Caught Up”. I løbet af de næste ti år havde Jackson en række succesfulde album og adskillige R&B-listeplaceringer, hvoraf den største var hendes version fra 1977 af Merle Haggards countryhit “If You’re Not Back in Love By Monday”. Den single blev efterfulgt af mange flere, bl.a. hendes version af Boney M.-sangen, diskosinglen “Never Change Lovers in the Middle of The Night”. Denne single toppede som nr. 33 på Black Singles chart i 1979.

Jackson indspillede i 1979 et album med Isaac Hayes kaldet “Royal Rappin’s” og samme år udgav hun et dobbeltalbum, “Live And Uncensored”, optaget til koncert på Los Angeles spillested, The Roxy, og “Live and Outrageous” på Atlanta’s Mr. V’s Figure8. Jackson dannede og producerede også gruppen Facts of Life. De fik et stort hit i 1976 med “Sometimes” (#3 R&B, nr. 31 Pop). Jackson stod uden et pladeselskab, da Spring lukkede i 1984, men i 1986 skrev hun under med Jive Records i en aftale, der producerede fire albums og resulterede i yderligere R&B Top Ten-hits med “Hot! Wild! Unrestricted! Crazy Love” og “Love Is a Dangerous Game”. Hun optrådte på et Elton John-nummer i 1985, “Act Of War”, som blev et Top 40-hit i Storbritannien, men som ikke nåede at komme på hitlisten i USA. I 1991 skrev, producerede og spillede hun hovedrollen i det succesfulde turnéstykke Young Man, Older Woman, der var baseret på hendes album af samme titel for Jive. Den 24. november 1994 optrådte Jackson i Thanksgiving-episoden Feast or Famine af Martin som Florine. I 2000 var hendes stemme med i “Am I Wrong” af Etienne de Crécy, som er samplet fra hendes optræden i “(If Loving You Is Wrong) I Don’t Want to Be Right”.

Jackson har ofte optrådt på “værste nogensinde”-lister for sine albumcovers. E.S.P. (Extra Sexual Persuasion) viser Jackson, der kigger ind i en krystalkugle, der fremhæver hendes kavalergang; Back to the S**t! afbilder Jackson siddende på et toilet, hvor det antydes, at hun er ved at afføring.

Jackson driver nu sit eget pladeselskab, Weird Wreckuds. Efter en længere pause fra pladeindspilning udgav hun i 2001 albummet Not For Church Folk, som markerede en tilbagevenden til hendes stil med en urban moderne lyd. Albummet indeholder singlerne “Butt-A-Cize” og “Leave Me Alone”. Albummet indeholder også et samarbejde med rapperen Da Brat på sangen “In My Life”. Jackson havde sit eget radioprogram i Dallas, Texas i 13 år. Jackson sendte via fjernbetjening fra sit hjem i Atlanta, Georgia, og arbejdede i eftermiddagstid fra kl. 15-18 på KKDA 730 AM indtil den 6. januar 2012.

I 2006 blev fem af Jacksons bedst sælgende album – Millie Jackson (1972), It Hurts So Good (1973), Caught Up (1974), Still Caught Up (1975) og Feelin’ Bitchy (1977) – digitalt remastered og udgivet på cd med bonusnumre. Alle Jacksons album fra Spring Records-æraen kan fås hos Ace Records i Storbritannien. An Imitation of Love blev genudgivet på cd i 2013 af mærket Funkytowngrooves i en remasteret, udvidet udgave. Andre album udgivet på Jive- og Ichiban-mærkerne er fortsat udsolgt, selv om nogle af disse sange optræder på kompilations-cd’er. Den 6. februar 2012 blev dokumentarfilmen Unsung – The Story of Mildred ‘Millie’ Jackson sendt på TV One-netværket. Jackson optrådte på Washington D.C.’s historiske Howard Theatre den 3. august 2012 og på B.B. King’s Blues Club i New York den 4. august 2012. Den 6. juni 2015 blev Jackson optaget i den officielle Rhythm & Blues Music Hall of Fame i Clarksdale, Mississippi.