Metyrapone kan anvendes til diagnosticering af binyrebarkinsufficiens. Metyrapone 30 mg/kg, maksimal dosis 3.000 mg, administreres ved midnat normalt sammen med en snack. Plasmakortisol og 11-deoxycortisol måles næste morgen mellem kl. 8.00 og 9.00 om morgenen. Et plasmakortisol på under 220 nmol/l tyder på en tilstrækkelig hæmning af 11β-hydroxylase. Hos patienter med intakt hypothalamo-hypofyse-binyreakse stiger CRH- og ACTH-niveauerne som reaktion på de faldende kortisolniveauer. Dette resulterer i en stigning i steroidprækursorerne i vejen. Hvis 11-deoxycortisolniveauet ikke stiger og forbliver under 7 µg/dl (202 nmol/l), og adrenocorticotropisk hormon (ACTH) stiger, tyder det derfor i høj grad på binyrebarkinsufficiens. Hvis hverken 11-deoxycortisol eller ACTH stiger, tyder det i høj grad på en forstyrret hypothalamus-hypofyse-nyrerne-akse ved enten hypofysen eller hypothalamus.

Metyrapton-test kan være med til at verificere årsagen til Cushings syndrom. De fleste patienter med hypofyse dysfunktion og/eller hypofyse mikroadenom vil øge ACTH-sekretionen som reaktion på metyrapone, mens de fleste ektopiske ACTH-producerende tumorer ikke vil gøre det. Hypofyse-makroadenomer reagerer ikke altid på metyrapone.

Metyrapone anvendes til medicinsk kontrol af hyperkortisolisme ved Cushings syndrom (ACTH-afhængigt eller uafhængigt). Målet for medicinsk behandling er at opnå præoperativ kontrol af hyperkortisolisme eller til kontrol af restsygdom, der persisterer postoperativt (TSS, adrenalektomi). Den er ikke beregnet til langsigtet definitiv behandling/helbredelse, men kun som et supplement (kirurgi er målet for helbredelse af de fleste årsager til Cushings syndrom). Metyrapone virker således ved at hæmme binyrebark steroidogenese. En bivirkning er hirsutisme (hos kvinder) på grund af de overskydende androgenprækursorer, der dannes. Det andet almindeligt anvendte middel til medicinsk behandling af Cushings syndrom er ketoconazol (et svampedræbende middel). Dette udviser ikke bivirkningen af hirsutisme.