I 1440 udsendte den italienske præst, humanist, retoriker og taler Lorenzo Valla et manuskript med titlen De falso credita et ementita Constantini Donatione declamatio, hvori han på historiske og sproglige grunde beviste, at Konstantins donation var en forfalskning. På grund af kirkelig modstand blev essayet ikke formelt udgivet på tryk før Ulrich von Huttens udgave fra 1517. Den blev populær blandt protestanter, og en engelsk oversættelse blev udgivet til Thomas Cromwell i 1534. Valla argumenterede sin sag så overbevisende, at den stadig står ved magt den dag i dag, og at Konstantins Donation of Constantine er ulovlig, er generelt anerkendt.

Valla viste, at dokumentet umuligt kunne være skrevet i Konstantin I’s historiske æra (4. århundrede), fordi dets folkekirkelige stil entydigt daterede sig til en senere æra (8. århundrede). En af Vallas grunde var, at dokumentet indeholdt ordet satrap, som han mente, at romere som Konstantin I ikke ville have brugt.

Og selv om det i begyndelsen blev mødt med stor kritik, blev Konstantins Donation of Constantine accepteret som legitim, især på grund af den gavnlige karakter af dets indhold for den vestlige kirke. Konstantins Donation antydede, at Konstantin I “donerede” hele det vestromerske imperium til den romersk-katolske kirke som en handling af taknemmelighed for at være blevet mirakuløst helbredt for spedalskhed af pave Sylvester I. Dette ville tydeligvis have bortvist Pepin den Korte’s egen Donation of Pepin, som gav langobarderne land nord for Rom.

“Valla blev motiveret til at afsløre Konstantins Donation of Constantine som et svindelnummer af sin daværende arbejdsgiver, Alfonso af Aragonien, som var involveret i en territorial konflikt med Pavestaten, der dengang var under pave Eugen IV. Donationen af Konstantin var ofte blevet citeret for at understøtte pavestolens temporale magt, i hvert fald siden det 11. århundrede” (Wikipedia-artikel om Lorenzo Valla, tilgået 17-01-2009).