Snav og effektiv ekstraktion og koncentration af nukleinsyre (NA) er nødvendig for point-of-care-analyse for at forhindre udbrud af epidemiske/pandemiske sygdomme. Typiske silica-baserede NA-ekstraktionsmetoder har begrænsninger, såsom at de er tidskrævende, kræver menneskelig indgriben og resulterer i et lavt genfindingsudbytte. I denne undersøgelse har vi udviklet en patogen DNA-ekstraktionsanordning baseret på elektrokinetisk separation inkorporeret med et nanofilter af siliciumnitrid (SiNx), som fremskynder DNA-ekstraktionsproceduren og har fordelene af at være praktisk, effektiv og billig. Denne DNA-ekstraktionsanordning består af en CNC-fræset Teflon-anordning med et cis-kammer som reservoir for cellelysat og et trans-kammer som reservoir for elueringsopløsning, hvor SiNx-nanofilteret er indsat mellem de to kamre. SiNx-nanofilteret blev fremstillet ved hjælp af en fotolitografisk metode i forbindelse med nanoimprinting. Ca. 7,2 millioner nanoporer med en diameter på 220 nm var placeret i midten af nanofilteret. Når der påføres et elektrisk DC-felt gennem nanoporerne, overføres DNA fra cis-kammeret til trans-kammeret for at isolere DNA’et fra celleaffaldet. For at demonstrere DNA-ekstraktionens ydeevne målte vi absorbanserne ved 260 og 280 nm og udførte en realtids-polymerasekædereaktion (realtids-PCR) ved hjælp af det genvundne DNA for at verificere dets gennemførlighed med henblik på genetisk analyse i efterfølgende led. Desuden fungerede DNA-ekstraktionsanordningen med succes ved hjælp af et 1,5 V alkalinebatteri, hvilket bekræfter anordningens bærbarhed til point-of-care-testning. Et sådant avanceret DNA-ekstraktionssystem kan anvendes på forskellige områder, herunder klinisk analyse, patogenpåvisning, retsmedicinsk analyse og påvisning på stedet.

Skriv et svar

Din e-mailadresse vil ikke blive publiceret.