Jacksons skivkarriär började enligt uppgift med att hon vågade delta i en talangtävling 1964 på Harlems nattklubb Smalls Paradise, som hon vann. Även om hon först spelade in för MGM Records 1970, lämnade hon det snart och inledde ett långt samarbete med New York-baserade Spring Records. Hon arbetade med bolagets interna producent Raeford Gerald och hennes första singel på listan var 1971 års bedrägliga ”A Child of God (It’s Hard to Believe)”, som nådde plats 22 på R-3117>B-listan. 1972 hade Jackson sin första topp tio-singel på R&B med uppföljaren ”Ask Me What You Want”, som också nådde topp 30 på poplistan, och sedan ”My Man, A Sweet Man” som nådde plats 7 på R&B och 50 på UK Singles Chart; alla tre låtarna var medskrivna av Jackson. ”My Man, A Sweet Man” består av nordisk soul, vilket även gäller för hennes inspelning ”A House for Sale” från 1976. Året därpå fick hon sin tredje amerikanska topp tio-hit, ”It Hurts So Good”, som hamnade på plats 3 på R&B-listan och på plats 24 på den amerikanska Billboard Hot 100-poplistan. Singeln fanns med på albumet med samma namn och i blaxploitationfilmen Cleopatra Jones.

1974 släppte hon albumet Caught Up, som introducerade hennes innovativa stil med raunchy spoken words. Det främsta bidraget var hennes version av Luther Ingrams miljonsäljare ”(If Loving You Is Wrong) I Don’t Want to Be Right”, för vilken hon fick två Grammy-nomineringar. Vid det här laget hade hon bytt producent för att endast arbeta med Brad Shapiro, som hade varit inblandad i ”It Hurts So Good” och ”Love Doctor”. Hon arbetade i Muscle Shoals Studio i Alabama med den berömda Muscle Shoals Rhythm Section och fortsatte att spela in det mesta av sitt material för Spring där, inklusive uppföljningsalbumet Still Caught Up. Under de följande tio åren hade Jackson en rad framgångsrika album och ett stort antal poster på R&B-listan, varav den största var hennes version från 1977 av Merle Haggards countryhit ”If You’re Not Back in Love By Monday”. Den singeln följdes av många fler, bland annat hennes version av Boney M.-låten, discosingeln ”Never Change Lovers in the Middle of the Night”. Denna singel nådde toppnoteringen 33 på Black Singles chart 1979.

Jackson spelade 1979 in ett album med Isaac Hayes som hette ”Royal Rappin’s” och samma år släppte hon ett dubbelalbum, ”Live And Uncensored”, inspelat på konsert i Los Angeles på The Roxy och ”Live and Outrageous” på Atlanta’s Mr. V’s Figure8. Jackson bildade och producerade även gruppen Facts of Life. De hade en stor hit 1976 med ”Sometimes” (#3 R&B, nr 31 Pop). Jackson stod utan bolag när Spring stängde 1984, men 1986 skrev hon kontrakt med Jive Records i ett avtal som producerade fyra album och resulterade i ytterligare topp tio-hits på R&B med ”Hot! Wild! Unrestricted! Crazy Love” och ”Love Is a Dangerous Game”. Hon medverkade 1985 på en Elton John-låt, ”Act Of War”, som blev en topp 40-hit i Storbritannien, men som inte lyckades nå en topplista i USA. 1991 skrev, producerade och spelade hon huvudrollen i den framgångsrika turnépjäsen Young Man, Older Woman, baserad på hennes album med samma titel för Jive. Den 24 november 1994 medverkade Jackson i Thanksgiving-avsnittet Feast or Famine av Martin som Florine. År 2000 var hennes röst med i ”Am I Wrong” av Etienne de Crécy, samplad från hennes framträdande i ”(If Loving You Is Wrong) I Don’t Want to Be Right”.

Jackson har ofta dykt upp på ”värsta någonsin”-listor för sina albumomslag. På E.S.P. (Extra Sexual Persuasion) tittar Jackson in i en kristallkula som framhäver hennes klyvning och på Back to the S**t! sitter Jackson på en toalett där det antyds att hon gör avföring.

Jackson driver numera sitt eget skivbolag, Weird Wreckuds. Efter ett längre uppehåll från inspelningar släppte hon 2001 albumet Not For Church Folk, som markerade en återgång till sin stil med ett urbant och modernt sound. Albumet innehåller singlarna ”Butt-A-Cize” och ”Leave Me Alone”. Albumet innehåller också ett samarbete med rapparen Da Brat på låten ”In My Life”. Jackson hade sitt eget radioprogram i Dallas, Texas i 13 år. Jackson sände via fjärrsändning från sitt hem i Atlanta, Georgia, och arbetade på eftermiddagstid från 15-18 på KKDA 730 AM, fram till den 6 januari 2012.

År 2006 återskapades fem av Jacksons bästsäljande album – Millie Jackson (1972), It Hurts So Good (1973), Caught Up (1974), Still Caught Up (1975), och Feelin’ Bitchy (1977) – digitalt och gavs ut på CD med bonusspår. Alla Jacksons album från Spring Records-tiden finns tillgängliga från Ace Records i Storbritannien. An Imitation of Love återutgavs på CD 2013 av skivbolaget Funkytowngrooves i en remastrad, utökad utgåva. Andra album som släpptes på etiketterna Jive och Ichiban är fortfarande slutsålda, även om några av dessa låtar förekommer på samlings-CD:er. Den 6 februari 2012 sändes dokumentären Unsung – The Story of Mildred ”Millie” Jackson på TV One. Jackson uppträdde på Washington DC:s historiska Howard Theatre den 3 augusti 2012 och på B.B. King’s Blues Club i New York den 4 augusti 2012. Den 6 juni 2015 blev Jackson invald i Official Rhythm & Blues Music Hall of Fame i Clarksdale, Mississippi.