Metyrapon kan användas vid diagnos av binjurebarksinsufficiens. Metyrapon 30 mg/kg, maximal dos 3 000 mg, administreras vid midnatt vanligtvis tillsammans med ett mellanmål. Plasmakortisol och 11-deoxykortisol mäts nästa morgon mellan kl. 8.00 och 9.00. Ett plasmakortisol på mindre än 220 nmol/l tyder på tillräcklig hämning av 11β-hydroxylas. Hos patienter med intakt hypotalamo-hypofys-binjureaxel stiger CRH- och ACTH-nivåerna som svar på de sjunkande kortisolnivåerna. Detta resulterar i en ökning av steroidprekursorerna i banan. Om 11-deoxycortisolnivåerna inte stiger och förblir under 7 µg/dl (202 nmol/l) och det adrenokortikotropa hormonet (ACTH) stiger, är det därför mycket troligt att binjurebarksinsufficiens föreligger. Om varken 11-deoxycortisol eller ACTH stiger, tyder det starkt på en nedsatt hypotalamus-hypofys-binjureaxel vid antingen hypofysen eller hypotalamus.

Metyrapon-test kan hjälpa till att verifiera orsaken till Cushings syndrom. De flesta patienter med hypofysdysfunktion och/eller hypofysmikroadenom kommer att öka ACTH-sekretionen som svar på metyrapon, medan de flesta ektopiska ACTH-producerande tumörer inte gör det. Hypofysära makroadenom svarar inte alltid på metyrapon.

Metyrapon används för medicinsk kontroll av hyperkortisolism vid Cushings syndrom (ACTH-beroende eller oberoende). Syftet med medicinsk behandling är att uppnå preoperativ kontroll av hyperkortisolism, eller för kontroll av restsjukdom som kvarstår postoperativt (TSS, binjurektomi). Den är inte avsedd för långsiktig definitiv behandling/kurering, utan endast som ett komplement (kirurgi är målet för att bota de flesta orsaker till Cushings syndrom). Metyrapon verkar alltså genom att hämma den binjureala steroidogenesen. En biverkan är hirsutism (hos kvinnor) på grund av det överskott av androgenprekursorer som skapas. Det andra vanligt förekommande medlet för medicinsk behandling av Cushings syndrom är ketokonazol (ett svampbekämpningsmedel). Detta uppvisar inte biverkningen hirsutism.