Această recenzie discută noile evoluții în microscopia de transfer de energie de rezonanță Förster (FRET) și aplicarea acesteia la receptorii celulari. Metoda se bazează pe teoria cinetică a FRET, care poate fi utilizată pentru a prezice FRET nu numai în dimeri, ci și în oligomeri de ordin superior de fluorofori donatori și acceptori. Modelele bazate pe astfel de predicții FRET pot fi adaptate la histogramele de eficiență FRET observate (denumite și spectrograme FRET) și pot fi utilizate pentru a estima constantele de legare intracelulară, valorile energiei libere și stoichiometriile. Aceste metode de „spectrometrie FRET” au fost utilizate pentru a analiza oligomerii formați de diverși receptori în căile de semnalizare celulară, dar până de curând astfel de studii au fost limitate la receptorii care rezidă la suprafața celulară. Pentru a studia complexele care rezidă în interiorul celulei, a fost dezvoltată o tehnică numită Quantitative Micro-Spectroscopic Imaging (Q-MSI). Q-MSI combină determinarea structurii cuaternare din spectrogramele FRET aparente la nivel de pixel cu determinarea concentrațiilor donatorilor și acceptorilor la nivel de organite. Acest lucru se realizează prin rezolvarea și analiza spectrului unui al treilea marker fluorescent, care nu participă la FRET. Q-MSI a fost utilizat pentru prima dată pentru a studia interacțiunea unei clase de receptori citoplasmatici care leagă ARN-ul viral și semnalează un răspuns antiviral prin intermediul unor complexe formate în principal pe membranele mitocondriale. Q-MSI a dezvăluit orientări ale receptorilor mitocondriali de ARN necunoscute anterior, precum și interacțiunea dintre receptorul ARN viral numit LGP2 cu ARN-elicaza codificată de virusul hepatitei. Importanța biologică a acestor noi observații este discutată.

Lasă un răspuns

Adresa ta de email nu va fi publicată.