Nefelometria este o tehnică utilizată în imunologie pentru a determina nivelurile mai multor proteine plasmatice din sânge. De exemplu, nivelurile totale ale izotipurilor sau claselor de anticorpi: Imunoglobulină M, Imunoglobulină G și Imunoglobulină A. Este importantă în cuantificarea lanțurilor ușoare libere în boli precum mielomul multiplu. Cuantificarea este importantă pentru clasificarea bolii și pentru monitorizarea bolii după ce un pacient a fost tratat (o înclinație crescută a raportului dintre lanțurile ușoare kappa și lambda după ce un pacient a fost tratat este un indiciu al recidivei bolii).
Se realizează prin măsurarea luminii împrăștiate la un unghi față de proba care se măsoară. În nefelometria de diagnosticare, ramura ascendentă a curbei Heidelberger-Kendall este extinsă prin optimizarea cursului reacției, astfel încât semnalele de măsurare ale majorității proteinelor plasmatice (din sângele uman) să cadă în partea stângă a curbei Heidelberger-Kendall, chiar și la concentrații foarte mari.
Această tehnică este utilizată pe scară largă în laboratoarele clinice, deoarece este relativ ușor de automatizat. Se bazează pe principiul conform căruia o suspensie diluată de particule mici va împrăștia lumina (de obicei un laser) care trece prin ea, în loc să o absoarbă pur și simplu. Cantitatea de dispersie este determinată prin colectarea luminii la un unghi (de obicei la 30 și 90 de grade).
Anticorpul și antigenul sunt amestecate în concentrații astfel încât să se formeze numai agregate mici care nu se depun rapid la fund. Se măsoară cantitatea de dispersie a luminii și se compară cu cantitatea de dispersie a amestecurilor cunoscute. Cantitatea de necunoscută se determină pe baza unei curbe standard.
Nefhelometria poate fi utilizată pentru a detecta fie antigenul, fie anticorpul, dar de obicei se efectuează cu anticorpul ca reactiv și cu antigenul pacientului ca necunoscut. În laboratorul de imunologie medicală, se pot efectua două tipuri de teste: „nefelometrie de punct final” și „nefelometrie cinetică (viteză)”.
Testele de nefelometrie cu punct final se execută lăsând reacția anticorp/antigen să se desfășoare până la finalizare (până când toți anticorpii reactivi prezenți și antigenii prezenți din proba pacientului care se pot agrega au făcut acest lucru și nu se mai pot forma complexe). Cu toate acestea, particulele mari vor cădea din soluție și vor cauza o citire falsă a împrăștierii, astfel că a fost concepută nefelometria cinetică.
În nefelometria cinetică, rata de împrăștiere este măsurată imediat după adăugarea reactivului. Atâta timp cât reactivul este constant, rata de schimbare poate fi considerată ca fiind direct legată de cantitatea de antigen prezentă.
.