SledgeEdit
Un microtometru cu sanie este un dispozitiv în care proba este plasată într-un suport fix (navetă), care apoi se deplasează înainte și înapoi pe un cuțit. Microtomurile moderne cu sanie au sania plasată pe un rulment liniar, un design care permite microtomului să taie cu ușurință multe secțiuni grosiere. Prin ajustarea unghiurilor dintre probă și cuțitul microtomei, se poate reduce presiunea aplicată probei în timpul tăierii. Aplicațiile tipice pentru acest tip de microtome constau în prepararea probelor mari, cum ar fi cele încorporate în parafină pentru preparate biologice. Grosimea tipică a tăieturii care poate fi obținută la un microtometru cu sanie este cuprinsă între 1 și 60 μm.
RotaryEdit
Acest instrument este un microtometru de construcție obișnuită. Acest dispozitiv funcționează cu o acțiune rotativă etapizată, astfel încât tăierea efectivă face parte din mișcarea de rotație. Într-un microtometru rotativ, cuțitul este de obicei fixat într-o poziție orizontală.
În figura din stânga, este explicat principiul tăierii. Prin mișcarea suportului de probă, proba este tăiată de cuțitul din poziția 1 în poziția 2, moment în care secțiunea proaspătă rămâne pe cuțit. În punctul cel mai înalt al mișcării de rotație, suportul de probă este avansat cu aceeași grosime ca și secțiunea care urmează să fie realizată, permițând realizarea următoarei secțiuni.
Volantul din multe microtoame poate fi acționat manual. Acest lucru are avantajul că se poate face o tăietură curată, deoarece masa relativ mare a volantului împiedică oprirea probei în timpul tăierii acesteia. Volantul de la modelele mai noi este adesea integrat în interiorul carcasei microtomului. Grosimea tipică de tăiere pentru un microtometru rotativ este cuprinsă între 1 și 60 μm. Pentru materiale dure, cum ar fi o probă înglobată într-o rășină sintetică, acest model de microtom poate permite obținerea unor secțiuni „semi-subțiri” bune, cu o grosime de până la 0,5 μm.
CriomicrotomEdit
Pentru tăierea probelor congelate, multe microtoame rotative pot fi adaptate pentru a tăia într-o cameră cu azot lichid, într-o așa-numită configurație de criomicrotom. Temperatura redusă permite creșterea durității probei, de exemplu prin trecerea prin tranziție vitroasă, ceea ce permite prepararea de probe semi-subțiri. Cu toate acestea, temperatura probei și temperatura cuțitului trebuie să fie controlate pentru a optimiza grosimea rezultată a probei.
UltramicrotomeEdit
Un ultramicrotom este un instrument principal al ultramicrotomiei. El permite prepararea de secțiuni extrem de subțiri, dispozitivul funcționând în același mod ca un microtometru rotativ, dar cu toleranțe foarte strânse la construcția mecanică. Ca urmare a construcției mecanice atente, dilatarea termică liniară a montajului este utilizată pentru a asigura un control foarte fin al grosimii.
Aceste secțiuni extrem de subțiri sunt importante pentru utilizarea cu microscopul electronic cu transmisie (TEM) și cu microscopul electronic cu scanare în serie cu fața blocată (SBFSEM) și, uneori, sunt importante și pentru microscopia optico-luminică. Grosimea tipică a acestor tăieturi este între 40 și 100 nm pentru microscopia electronică de transmisie și adesea între 30 și 50 nm pentru SBFSEM. Secțiuni mai groase, cu o grosime de până la 500 nm, sunt, de asemenea, prelevate pentru aplicații TEM specializate sau pentru secțiuni de studiu de microscopie optică pentru a selecta o zonă pentru secțiunile subțiri finale. Cuțitele de diamant (de preferință) și cuțitele de sticlă sunt utilizate cu ultramicrotomurile. Pentru a colecta secțiunile, acestea plutesc deasupra unui lichid pe măsură ce sunt tăiate și sunt preluate cu grijă pe grile adecvate pentru vizualizarea specimenelor TEM. Grosimea secțiunii poate fi estimată după culorile de interferență ale peliculei subțiri de lumină reflectată care se observă ca urmare a grosimii extrem de mici a probei.
VibrațieEdit
Microtomul vibrator funcționează prin tăiere folosind o lamă vibrantă, permițând ca tăietura rezultată să fie făcută cu mai puțină presiune decât ar fi necesară pentru o lamă staționară. Microtomul vibrator este utilizat de obicei pentru probe biologice dificile. Grosimea tăieturii este de obicei de aproximativ 30-500 μm pentru țesut viu și 10-500 μm pentru țesut fixat.
O variație a microtomului vibrator este microtomul Compresstome. Compresstome utilizează o seringă de probă sau un tub „asemănător unui ruj” pentru a ține țesutul. Specimenul de țesut este complet încorporat în agaroză (o polizaharidă), iar țesutul este presat încet și ușor din tub pentru ca lama vibrantă să taie. Dispozitivul funcționează în felul următor: capătul tubului de probă de unde iese țesutul este ușor mai îngust decât capătul de încărcare, ceea ce permite o ușoară „comprimare” a țesutului pe măsură ce acesta iese din tub. Această ușoară compresie previne forfecarea, tăierea neuniformă și formarea artefactelor de vibrație. Rețineți că tehnologia de compresie nu deteriorează și nu afectează țesutul secționat.
Există mai multe avantaje ale microtomului Compresstome: 1) învelișul de agaroză oferă stabilitate întregului specimen pe toate laturile, ceea ce previne secționarea neuniformă sau forfecarea țesutului; 2) tehnologia de compresie comprimă ușor țesutul pentru o tăiere uniformă, astfel încât lama nu împinge țesutul; 3) secționarea mai rapidă decât majoritatea microtomurilor cu vibrații; și 4) taie bine țesutul de la animale mai bătrâne sau mai mature pentru a oferi țesuturi mai sănătoase.
SawEdit
Microtomul cu ferăstrău este special pentru materiale dure, cum ar fi dinții sau oasele. Microtomul de acest tip are un ferăstrău rotativ încastrat, care taie proba. Microtome laser
Microtomul laser este un instrument pentru felierea fără contact. Nu este necesară pregătirea prealabilă a probei prin înglobare, congelare sau fixare chimică, minimizând astfel artefactele rezultate din metodele de pregătire. Alternativ, acest model de microtometru poate fi utilizat și pentru materiale foarte dure, cum ar fi oasele sau dinții, precum și pentru unele materiale ceramice. În funcție de proprietățile materialului de eșantionare, grosimea care poate fi obținută este cuprinsă între 10 și 100 μm.
Dispozitivul funcționează prin acțiunea de tăiere a unui laser cu infraroșu. Deoarece laserul emite o radiație în infraroșu apropiat, în acest regim de lungime de undă laserul poate interacționa cu materialele biologice. Prin focalizarea ascuțită a sondei în interiorul probei, se poate obține un punct focal de intensitate foarte mare, de până la TW/cm2. Prin interacțiunea neliniară a pătrunderii optice în regiunea focală se introduce o separare a materialelor într-un proces cunoscut sub numele de fotodistrugere. Prin limitarea duratei impulsurilor laser la intervalul de femtosecunde, energia consumată în regiunea țintă este controlată cu precizie, limitând astfel zona de interacțiune a tăieturii la mai puțin de un micrometru. În afara acestei zone, timpul foarte scurt de aplicare a fasciculului introduce daune termice minime sau inexistente pentru restul probei.
Radiația laser este dirijată pe un sistem optic bazat pe o oglindă de scanare rapidă, care permite poziționarea tridimensională a intersecției fasciculului, permițând în același timp traversarea fasciculului până la regiunea de interes dorită. Combinația de putere mare cu o rată mare de rasterizare permite scanerului să taie suprafețe mari de eșantion într-un timp scurt. În microtomul cu laser este posibilă, de asemenea, microdisecția cu laser a zonelor interne din țesuturi, a structurilor celulare și a altor tipuri de caracteristici mici.
.