Genotoxicitatea se referă la capacitatea unei substanțe de a deteriora informația genetică a celulelor (modificări ale structurii, secvenței și/sau numărului de gene), care poate avea efecte directe sau indirecte, cum ar fi inducerea de mutații, activarea sau inactivarea genelor. În mod normal, căile de reparare a ADN-ului sau de apoptoză sunt activate pentru a repara sau a controla daunele; cu toate acestea, dacă daunele sunt fixate, se poate produce mutageneză și chiar cancer. De multe ori, modificările sunt permanente și ereditare, astfel încât pot afecta atât celulele somatice, cât și celulele germinale, care vor fi transmise generațiilor viitoare. Din definiție reiese clar că toți agenții mutageni au genotoxicitate, dar compușii genotoxici nu sunt neapărat mutageni. Genotoxicitatea afectează sănătatea pacienților și chiar a bebelușilor acestora, fiind astfel un aspect important de luat în considerare în timpul autorizării IND. Mai mult, testele de genotoxicitate sunt, de asemenea, teste comune in vitro pentru a prezice carcinogenitatea. Creative Biolabs a dezvoltat diverse abordări pentru estimarea genotoxicității medicamentelor candidate și pentru a ajuta clienții să adune informații pentru IND-enabling.

Scopul testelor de genotoxicitate este de a determina dacă un medicament candidat va deteriora materialele genetice din celule și va provoca cancer. În astfel de teste, după expunerea la compus, se măsoară deteriorarea ADN-ului (de exemplu, mutații punctiforme, ruperi de catenă, reticulații, aberații cromozomiale structurale și/sau numerice și pierderea reparării prin excizie) în celule. Există o varietate de teste de genotoxicitate care pot fi efectuate în celule bacteriene, de drojdie și de mamifere. Testul Ames și testul de mutație inversă Escherichia coli sunt două metode de testare a mutagenității in vitro bazate pe celule bacteriene, în timp ce testul de aberații cromozomiale la mamifere și testul de mutație genetică în celule de mamifere se bazează pe celule de mamifere. Testul Ames și testul Comet sunt două dintre cele mai populare metode utilizate pentru a evalua potențialul substanțelor chimice de a provoca leziuni ale ADN-ului și cancer.

Testul Ames (test de mutație inversă bacteriană)

Testul Ames utilizează tulpini de bacterii mutante auxotrofe care au nevoie de histidină din mediul înconjurător pentru a se dezvolta. În testul Ames, dacă substanța testată este capabilă să creeze mutații (genotoxice) care duc la o stare prototrofică a tulpinilor, celulele ar trebui să aibă o creștere normală a pe un mediu fără histidină.

Figura 1. Testul Ames.

Testul Comet (Single Cell Gel Electrophoresis Assay)

Testul Comet este unul dintre cele mai comune teste de genotoxicitate. Celulele sunt lizate cu detergenți și săruri, iar ADN-ul eliberat trece prin electroforeza pe gel de agaroză în condiții de pH aproape neutru. Cu cât o celulă conține mai multe rupturi bicatenare, cu atât ADN-ul va migra mai repede spre anod. Această tehnică este destul de sensibilă pentru a detecta deteriorarea ADN-ului, ușor și ieftin de realizat și rapid pentru a obține rezultatele testului.

Alte teste toxicologice in vitro și in vivo, cum ar fi testul TK+/- al limfomului de șoarece, testul SOS/umu și testul micronucleului in vitro și in vivo sunt, de asemenea, utilizate în determinarea genotoxicității compușilor.

Creative Biolabs oferă, de asemenea, alte servicii de descoperire a medicamentelor. Pentru informații mai detaliate, vă rugăm să nu ezitați să ne contactați sau să ne trimiteți direct o anchetă.

Numai pentru uz de cercetare în laborator.