Interacțiunile biomoleculare sunt fundamentale pentru marea majoritate a proceselor celulare, iar identificarea componentelor majore care interacționează este, de obicei, primul pas spre înțelegerea mecanismelor care guvernează diferite funcții celulare. Astfel, analizele statistice ale imaginilor care pot fi efectuate pe imagini de microscopie cu fluorescență ale celulelor fixate sau vii au fost aplicate în mod curent pentru studii biofizice și de biologie celulară. Aceste abordări măsoară fracțiunea de particule care interacționează prin analizarea imaginilor de fluorescență cu două culori pentru pixelii colocalizați. Algoritmii de colocalizare s-au dovedit a fi eficienți, deși gama dinamică și precizia acestor măsurători nu au fost niciodată bine stabilite. Spectroscopia de corelație încrucișată a imaginilor spațiale (ICCS), care corelează încrucișat fluctuațiile de intensitate spațială înregistrate în imagini de la două canale de detecție simultan, s-a dovedit recent a fi, de asemenea, o măsură eficientă a colocalizării. Prin intermediul simulărilor, al imagisticii anticorpilor fluorescenți adsorbiți pe sticlă și al măsurătorilor celulare, arătăm că ICCS se comportă mult mai bine decât algoritmii standard de colocalizare la densități moderate sau mari de particule, care sunt adesea întâlnite în sistemele celulare. În plus, s-a constatat că raportul de densitate dintre cele două specii marcate de interes joacă un rol major în precizia analizei colocalizării. Prin aplicarea unei comparații directe și sistematice între algoritmul de colocalizare standard, de microscopie cu fluorescență, și ICCS spațial, arătăm regimurile în care fiecare abordare este aplicabilă și, mai important, în care acestea nu reușesc să producă rezultate precise.

.