Nefelometria jest techniką stosowaną w immunologii do oznaczania poziomów kilku białek osocza krwi. Na przykład całkowity poziom izotypów lub klas przeciwciał: Immunoglobulina M, Immunoglobulina G, i Immunoglobulina A. Jest to ważne w kwantyfikacji wolnych łańcuchów lekkich w chorobach takich jak szpiczak mnogi. Kwantyfikacja jest ważna dla klasyfikacji choroby i dla monitorowania choroby po leczeniu pacjenta (zwiększone przekrzywienie stosunku między łańcuchami lekkimi kappa i lambda po leczeniu pacjenta jest wskaźnikiem nawrotu choroby).
Jest wykonywana przez pomiar światła rozproszonego pod kątem od mierzonej próbki. W nefelometrii diagnostycznej, wstępująca gałąź krzywej Heidelbergera-Kendalla jest przedłużona poprzez optymalizację przebiegu reakcji tak, że sygnały pomiarowe większości białek osocza (z ludzkiej krwi) wypadają po lewej stronie krzywej Heidelbergera-Kendalla, nawet przy bardzo wysokich stężeniach.
Ta technika jest szeroko stosowana w laboratoriach klinicznych, ponieważ jest stosunkowo łatwo zautomatyzowana. Opiera się ona na zasadzie, że rozcieńczona zawiesina małych cząstek rozprasza światło (zwykle laserowe) przechodzące przez nią, zamiast po prostu je pochłaniać. Ilość rozproszenia jest określana poprzez zbieranie światła pod kątem (zazwyczaj 30 i 90 stopni).
Przeciwciało i antygen są mieszane w stężeniach takich, że tworzą się tylko małe agregaty, które nie osiadają szybko na dnie. Ilość rozproszenia światła jest mierzona i porównywana z ilością rozproszenia w znanych mieszaninach. Ilość niewiadomej jest oznaczana z krzywej wzorcowej.
Nefelometria może być używana do wykrywania antygenu lub przeciwciała, ale zwykle jest wykonywana z przeciwciałem jako odczynnikiem i antygenem pacjenta jako niewiadomą. W Laboratorium Medycznym Immunologii można przeprowadzić dwa rodzaje testów: „nefelometria punktu końcowego” i „nefelometria kinetyczna (szybkościowa)”.
Testy nefelometrii punktu końcowego są przeprowadzane przez umożliwienie reakcji przeciwciała/antygenu, aby przebiegała do końca (aż wszystkie obecne przeciwciała odczynnika i obecne antygeny próbki pacjenta, które mogą się agregować, zrobią to i nie będzie można utworzyć więcej kompleksów). Jednakże, duże cząsteczki wypadną z roztworu i spowodują fałszywy odczyt rozproszenia, dlatego też opracowano nefelometrię kinetyczną.
W nefelometrii kinetycznej, szybkość rozproszenia jest mierzona zaraz po dodaniu odczynnika. Tak długo, jak odczynnik jest stały, szybkość zmian może być postrzegana jako bezpośrednio związana z ilością obecnego antygenu.
.