W biologii komórki, mikrosomy są heterogenicznymi, pęcherzykowatymi artefaktami (~20-200 nm średnicy) ponownie uformowanymi z kawałków retikulum endoplazmatycznego (ER), gdy komórki eukariotyczne są rozbite w laboratorium; mikrosomy nie są obecne w zdrowych, żywych komórkach.

Mikrosomy mogą być skoncentrowane i oddzielone od innych szczątków komórkowych przez wirowanie różnicowe. Nierozbite komórki, jądra i mitochondria osadzają się przy 10,000 g, podczas gdy rozpuszczalne enzymy i pofragmentowany ER, który zawiera cytochrom P450 (CYP), pozostają w roztworze (g to przyspieszenie grawitacyjne Ziemi). Przy 100 000 g, co uzyskuje się dzięki szybszym obrotom wirówki, ER sedymentuje z roztworu w postaci granulatu, ale rozpuszczalne enzymy pozostają w supernatancie. W ten sposób cytochrom P450 w mikrosomach zostaje zagęszczony i wyizolowany. Mikrosomy mają czerwono-brązowy kolor, ze względu na obecność hemu. Ze względu na konieczność istnienia wieloczęściowego systemu białkowego, mikrosomy są niezbędne do analizy aktywności metabolicznej CYPs. Te CYP występują w dużych ilościach w wątrobach szczurów, myszy i ludzi, ale są obecne również we wszystkich innych organach i organizmach.

Aby uzyskać mikrosomy zawierające specyficzny CYP lub duże ilości aktywnego enzymu, mikrosomy są przygotowywane z komórek owadów Sf9 lub w drożdżach poprzez heterologiczną ekspresję. Alternatywnie można również przeprowadzić ekspresję w Escherichia coli całych lub okrojonych białek. Dlatego mikrosomy są cennym narzędziem do badania metabolizmu związków (inhibicja enzymów, klirens i identyfikacja metabolitów) oraz do badania interakcji lek-lek w badaniach in vitro. Naukowcy często wybierają partie mikrosomów w oparciu o poziom aktywności enzymatycznej określonych CYPs. Niektóre partie są dostępne do badania określonych populacji (na przykład: mikrosomy płucne od osób palących lub niepalących) lub podzielone na klasyfikacje w celu spełnienia docelowych poziomów aktywności CYP do badań nad inhibicją i metabolizmem.

Badacze używają mikrosomów do naśladowania aktywności retikulum endoplazmatycznego w probówce i przeprowadzania doświadczeń wymagających syntezy białek na błonie; zapewniają one naukowcom sposób na ustalenie, w jaki sposób białka są wytwarzane na ER w komórce poprzez odtworzenie procesu w probówce.

.

Dodaj komentarz

Twój adres e-mail nie zostanie opublikowany.