Estry alkilowe
Estry metylowe są najczęściej otrzymywane w katalizowanych kwasem reakcjach z metanolem. Podstawową zaletą tej metody jest równoczesna estryfikacja wolnych kwasów i transestryfikacja kwasów związanych. Najczęściej stosowanymi katalizatorami są BF3, HCl i H2SO4, zwykle w postaci odpowiednio 14%, 5% i 2% roztworów. W przypadku BF3 reakcja przebiega najszybciej, wymaga gotowania mieszaniny przez 2 min w przypadku wolnych kwasów i 30-60 min w przypadku lipidów. W przypadku HCl i H2SO4 wymagany jest około dwukrotnie dłuższy czas. Wyższe stężenie BF3 w porównaniu z innymi katalizatorami może być odpowiedzialne nie tylko za szybszą reakcję, ale także za częściową degradację kwasów nienasyconych i odnotowane tworzenie się artefaktów. Problemy te można ograniczyć poprzez wcześniejsze zmydlanie metanolowym KOH, a następnie ponowną estryfikację powstałych wolnych kwasów w łagodnych warunkach. Kilka oficjalnych metod opiera się na tej procedurze.
Zastąpienie konwencjonalnego ogrzewania promieniowaniem mikrofalowym może znacznie skrócić czas reakcji i zmniejszyć degradację lipidów. Tak więc, stosując odczynnik BF3-metanol, czas reakcji wynoszący 30 s wystarczył do transestryfikacji większości lipidów do ich estrów metylowych kwasów tłuszczowych (FAME) przy mniejszym utlenieniu nienasyconych składników.
Reakcje katalizowane zasadą są szeroko stosowane do transestryfikacji lipidów, ponieważ przebiegają szybciej niż reakcje w środowisku kwaśnym bez degradacji nienasyconych kwasów tłuszczowych. Nie estryfikują one jednak wolnych kwasów tłuszczowych. Najczęściej stosowanymi odczynnikami są metanolowe roztwory NaOCH3 lub KOH. Transmetylacja lipidów jest zazwyczaj kompletna w ciągu 5 minut w temperaturze pokojowej.
Silne zasady organiczne mogą być stosowane podobnie i posiadają wielką zaletę tworzenia soli, które, w przeciwieństwie do ich nieorganicznych analogów, mogą być pirolizowane do estrów metylowych w wysokich temperaturach portu wtryskowego GC. Pozwala to na proste, jednoetapowe oznaczanie zarówno wolnych, jak i związanych kwasów. Zasady organiczne, które zostały zalecone do takiej konwersji pirolitycznej obejmują (m-trifluorometylofenylo)-trimetyloamoniowy, trimetylofenyloamoniowy i wodorotlenki trimetylo-sulonowe. Ten ostatni odczynnik wymaga najniższej temperatury pirolizy i daje nieszkodliwe produkty uboczne. Jest on po prostu dodawany do roztworu próbki, mieszany i wstrzykiwany.
Estryfikacja wolnych kwasów diazometanem przebiega szybko z wysoką wydajnością w łagodnych warunkach, z minimalnymi reakcjami ubocznymi. Opracowano specjalny mikrosprzęt, odczynniki i procedury, które pozwalają na względnie bezpieczne obchodzenie się z diazometanem, pomimo jego toksycznego i wybuchowego charakteru. Inne interesujące odczynniki to chloroformiany alkilowe, które mogą estryfikować wolne kwasy nawet w obecności znacznej ilości wody (40%). Inny odczynnik, dimetyloformamid dimetyloacetal, może być po prostu zmieszany z próbką kwasu i wstrzyknięty do GC; reakcja zachodzi w gorącym porcie wtryskowym. Sole srebrowe lub potasowe kwasów mogą być przekształcone do estrów za pomocą jodku metylu lub siarczanu metylu. Opisano wiele innych reakcji.
Kwasy o krótkim łańcuchu są często derywatyzowane do wyższych estrów za pomocą butanolu lub izopropanolu i katalizatorów kwasowych w celu zmniejszenia strat spowodowanych lotnością i znaczną rozpuszczalnością w wodzie. Wyższe diazoalkany mogą być również stosowane, jeżeli estry metylowe są zbyt lotne.
Enancjomery optycznie czynnych kwasów karboksylowych zostały rozdzielone po katalizowanej kwasem estryfikacji chiralnym alkoholem, takim jak S(+)-2-butanol, R(-)-2-oktanol lub (-)-metanol lub transestryfikacji mentylanem sodu. Diastereometryczne estry zostały również przygotowane z optycznie czynnych kwasów przez reakcję z O-(-)-mentylo-N,N-diizopropyloizomocznikiem.
Powyższe estry sililowe i alkilowe są najczęściej wykrywane przez detektor płomieniowo-jonizacyjny (FID). Większą czułość można jednak uzyskać przez tworzenie chlorowcowanych estrów sililowych, np. chlorometyldimetylosilililu, i monitorowanie za pomocą detektora wychwytu elektronów (ECD). Podobnie, bardzo małe ilości lotnych kwasów mogą być wykrywane poprzez ich estry pentafluorobenzylowe (PFB) za pomocą ECD. Specjalne pochodne dla tego detektora obejmują estry 2-chloroetylowe i trichloroetylowe.
.