A detecção pré-natal de anomalias cromossómicas é oferecida há mais de 40 anos, primeiro por amniocentese no início dos anos 70 e adicionalmente por amostragem de vilosidades coriónicas (CVS) no início dos anos 80. Dada a associação bem reconhecida entre o aumento da idade materna e a trissomia,1-3 a utilização primária dos testes pré-natais tem sido feita por mães mais velhas. Isso reduziu drasticamente a incidência de crianças aneuplóides nascidas de mães mais velhas.4 Embora mulheres mais jovens tenham riscos relativamente baixos de conceber uma criança com aneuploidia, a maioria das mulheres grávidas está no final da adolescência, na faixa etária dos 20 e 30 anos. Como tal, a maioria dos bebês aneuplóides viáveis nasce dessas mães mais jovens.5 O diagnóstico pré-natal invasivo (SVC e amniocentese) não é uma opção viável para todas as mães de baixo risco, uma vez que esses procedimentos acarretam um risco pequeno mas finito e acabariam por causar mais abortos espontâneos do que se detectasse a aneuploidia. Por esta razão, foram desenvolvidos vários testes não invasivos – incluindo a avaliação de risco no primeiro trimestre com 11 a 14 semanas, o rastreio do soro materno (quad) com 15 a 20 semanas e o levantamento estrutural fetal ultra-sonográfico com 18 a 22 semanas – todos concebidos para dar à mulher uma estimativa ajustada (mais precisa) de ter um feto aneuplóide usando como linha de base o seu risco a priori relacionado com a idade. A ultra-sonografia e a análise sérica materna são consideradas procedimentos de rastreio e ambas requerem acompanhamento por CVS ou amniocentese nos casos de rastreio positivos para um diagnóstico definitivo de uma anomalia cromossómica no feto. A capacidade de isolar células fetais e DNA fetal do sangue materno durante a gravidez abriu oportunidades excitantes para a melhoria dos testes pré-natais não-invasivos (TNI). A análise direta das células fetais da circulação materna tem sido um desafio dada a escassez de células fetais no sangue materno (1:10.000-1:1.000.000) e o foco mudou para a análise do DNA fetal livre de células, que é encontrado em uma concentração quase 25 vezes maior do que a disponível a partir de células de sangue nucleadas extraídas de um volume similar de sangue materno inteiro. Existem agora inúmeros relatórios sobre o uso de DNA livre de células (cfDNA) para NIPT para aneuploidias cromossômicas – especialmente trissomia (uma cópia extra de um cromossomo) ou monossomia (um cromossomo ausente) – e uma série de produtos comerciais já estão sendo comercializados para esta indicação. Este artigo revisa as várias técnicas que estão sendo utilizadas para analisar o DNA livre de células na circulação materna para a detecção pré-natal de anormalidades cromossômicas e as evidências que suportam cada uma delas. Diversas áreas de controvérsia em andamento são abordadas, incluindo o momento da coleta de amostras de sangue materno, a necessidade de aconselhamento genético e o uso de testes invasivos confirmatórios. Aplicações futuras para esta tecnologia também são revistas.