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MyD88 é um adaptador chave downstream para a maioria dos receptores Toll-like (TLRs) e receptores interleucina-1 (IL1Rs) (resumo por Von Bernuth et al., 2008).

O marcador de diferenciação mielóide (MyD) MyD88 foi caracterizado pela primeira vez durante um estudo das respostas genéticas iniciais das células mielóides murinas a vários estímulos de diferenciação e inibição de crescimento (Lord et al., 1990). Os genes de resposta primária de diferenciação mielóide são ativados em células mielo-leucêmicas M1 em resposta à interleucina-6 (IL6; 147620), o que induz tanto a parada de crescimento quanto a diferenciação terminal. Hardiman et al. (1997) descreveram a clonagem do gene MyD88 do rato. O primeiro exon codifica um ‘domínio de morte’ completo semelhante ao segmento intracelular do receptor TNF-1 (191190). A análise de Zoo-blot demonstrou que se trata de um gene conservado evolutivamente. A análise Northern blot revelou a expressão generalizada do gene em muitos tecidos de camundongos adultos, e o RT-PCR detectou MyD88 mRNA nas linhas de células T e B e diferenciando as células estaminais embrionárias. O padrão de expressão ampla demonstrou que a expressão do Myd88 de camundongo não é restrita a células da linhagem mielóide, como se acreditava originalmente.

Bonnert et al. (1997) clonaram um MYD88 cDNA humano que codifica um polipéptido de 296-aminoácidos com uma massa prevista de 33 kD. O MYD88 partilha 81% da identidade do aminoácido com o murino MyD88. A região terminal de 150-aminoácidos C tem uma homologia significativa ao receptor de interleucina-1 tipo I (147810) domínio citoplasmático. A análise de Northern blot revelou que o MYD88 humano é expresso como 2 MYD88 hibridizando 1,6- e 3kb mRNAs em uma variedade de tecidos e linhas celulares.

Usando a análise de imunofluorescência, Kagan e Medzhitov (2006) descobriram que o MYD88 humano localizou-se em focos discretos espalhados pelo citosol de fibroblastos e macrófagos embrionários de camundongos transfectados.

Bonnert et al. (1997) descobriram que a sobreexpressão da MYD88 causou um aumento no nível de transcrição do promotor interleucina-8 (146930).

Muzio et al. (1997) reportaram que o domínio C-terminal do MYD88 tem uma sequência significativa semelhante ao domínio citoplasmático do IL1RAP (602626). Eles mostraram que a expressão ectópica da MYD88 induziu fortemente a atividade NFKB (por exemplo, 164011) de uma forma dependente da concentração. Além disso, a região C-terminal da MYD88 actuou como inibidor dominador-negativo da actividade induzida pela IL1R1 (147810)/IL1RAP pela NFKB. A MYD88 formou um complexo imunoprecipitável com IL1RAP e com IRAK2 (603304).

Medzhitov et al. (1998) demonstraram que a sinalização pelo receptor humano TOLL (ver TLR4; 603030) emprega uma proteína adaptadora, MyD88, e induz a activação da NFKB através da kinase IRAK (IRAK1; 300283) e da proteína TRAF6 (602355). A cascata de sinalização mediada pela portagens utilizando a via NFKB é essencial para a resposta imunológica na Drosophila adulta, e um homólogo humano da proteína Drosophila Toll induz vários genes de resposta imunológica através desta via. Estes achados implicam o MyD88 como uma molécula adaptadora/reguladora geral para a família de receptores Toll/IL1R para imunidade inata.

Hayashi et al. (2001) mostraram que a expressão de TLR5 (603031) induz a ativação de NFKB (ver 164011) e a produção de TNFA (191160). Os padrões moleculares associados a patógenos (PAMPs) conhecidos por estimularem outros membros da família TLR não conseguiram estimular o TLR5; no entanto, os ensaios de luciferase reportaram a ativação do TLR5 em sobrenadantes de cultura bacteriana gram-positivos e -negativos. Por fracionamento de sobrenadantes de cultura de Listeria seguido de SDS-PAGE, Hayashi et al. (2001) identificaram flagelina como o ligante TLR5. A flagelina, um componente principal da flagelina bacteriana, é um fator de virulência reconhecido pelo sistema imunológico inato em plantas, insetos e mamíferos. A expressão de flagelina em bactérias não flageladas resultou na ativação do TLR5, e a deleção de flagelina das bactérias flageladas revogou a ativação do TLR5. Hayashi et al. (2001) demonstraram que a injeção de flagelina induz a produção de IL6 (147620) em ratos do tipo selvagem, mas não naqueles sem a proteína do adaptador MyD88, necessária para a sinalização de TLR. Hayashi et al. (2001) concluíram que o TLR5 é um receptor de reconhecimento de padrões e que seu PAMP é flagelina, uma proteína com terminação N e C conservada em um amplo grupo de patógenos móveis.

Burns et al. (2003) notaram que uma variante da emenda MYD88 codifica uma proteína, MYD88s, sem o domínio intermediário 58-amino ácido entre o domínio morte e o domínio C-terminal TIR. O MYD88s só é detectado após estimulação contínua com produtos bacterianos, como o lipopolissacarídeo (LPS), ou citocinas pró-inflamatórias. A expressão do MYD88s bloqueia a activação induzida por LPS ou IL1 pela NFKB, embora, tal como a proteína a todo o comprimento, o MYD88s ligue tanto o IL1R como o IRAK1. Por Western blot analysis of a reconstituted MYD88 -/- cell line, Burns et al. (2003) mostraram que o MYD88, mas não o MYD88s, desencadeou a fosforilação IRAK1 e a activação da NFKB de uma forma dependente do IRAK4 (606883). O MYD88s não ligou o IRAK4 e bloqueou o seu recrutamento para IL1Rs. Burns et al. (2003) concluíram que o MYD88s age como um regulador negativo dos sinais de IL1R/TLR/MYD88, levando a uma regulação negativa controlada das respostas imunes inatas.

Diebold et al. (2004) confirmaram que as células dendríticas plasmocitóides do rato (PDCs) expressando B220 (PTPRC; 151460) mas não Cd11b (ITGAM; 120980) eram resistentes à supressão da produção de Ifna (147660) mediada pela proteína NS1 do vírus da gripe, sugerindo que os PDCs usam uma via independente de dsRNA para o reconhecimento da gripe. A produção de Ifna inibida pela cloroquina, indicando que o reconhecimento do vírus ocorre no compartimento endossômico. Se a produção de um adn em resposta ao vírus vivo ou inativado da influenza ou ao ssRNA genômico viral ou hospedeiro exigiu a presença de Myd88 e Tlr7 (300365), mas não de outros TLRs.

Kagan e Medzhitov (2006) descobriram que o TIRAP humano (606252), uma proteína adaptadora de TLR, recrutou o MYD88 humano para a membrana plasmática de fibroblastos e macrófagos de camundongos transfectados. Eles propuseram que TIRAP funciona principalmente para recrutar MYD88 para ativar TLR4 para iniciar a transdução de sinal.

Chen et al. (2007) descobriram que a resposta inflamatória neutrofílica aguda à lesão celular requer a proteína sinalizadora Myd88. A análise da contribuição dos receptores dependentes de Myd88 para esta resposta revelou apenas uma pequena redução em ratos duplamente deficientes no receptor-2 tipo Toll-like (Tlr2; 603028) e Tlr4 (603030) e respostas normais em ratos sem Tlr1 (601194), Tlr3 (603029), Tlr6 (605403), Tlr7 (300365), Tlr9 (605474), ou Tlr11 (606270) ou o receptor IL18 (IL18R; 604494). Entretanto, ratos sem IL1R (147810) mostraram uma resposta inflamatória neutrofílica acentuadamente reduzida a células mortas e lesão tecidual in vivo, bem como uma grande diminuição dos danos colaterais da inflamação. Esta resposta inflamatória requereu IL1-alfa (147760), e a função IL1R foi requerida em células não derivadas de medula óssea. Notadamente, a resposta aguda dos monócitos à morte celular, que é considerada importante para a reparação tecidual, era muito menos dependente da via IL1R-Myd88. Além disso, esta via não era necessária para a resposta neutrofílica a um estímulo microbiano. Estes achados sugerem que inibir a via IL1R-MYD88 in vivo poderia bloquear o dano da inflamação aguda que ocorre em resposta à morte celular estéril, e fazê-lo de uma forma que não comprometa a reparação tecidual ou a defesa do hospedeiro contra patógenos.

Ao estimular células endoteliais microvasculares humanas expressando FADD (602457) com LPS, que ativa a via de sinalização TLR4, Zhande et al. (2007) mostraram que o FADD atenuou a ativação da via JNK (MAPK8; 601158) e PI3K (ver 171834) de forma dependente do domínio da morte. As células do rato sem Fadd mostraram uma hiperactivação destas vias. As análises de coimunoprecipitação e immunoblot em células humanas revelaram que o FADD interagia com o IRAK1 e o MYD88. A estimulação LPS aumentou a interação IRAK1-FADD e o recrutamento do complexo para ativar o MYD88. Em células de rato sem Irak1, Fadd não se associou ao Myd88. O shuttling mediado por IRAK1 de FADD para MYD88 permitiu a ativação controlada e limitada do caminho de sinalização TLR4. A expressão forçada de FADD inibiu o surgimento de células endoteliais induzidas por LPS, mas não pelo VEGF (VEGFA; 192240)-. A deficiência de Fadd em células de camundongos levou ao aumento da produção de citocinas pró-inflamatórias induzida pela estimulação de Tlr4 e Tlr2, mas não de Tlr3, e a reconstituição de Fadd reverteu o aumento da produção de citocinas pró-inflamatórias. Zhande et al. (2007) concluíram que FADD é um regulador negativo das respostas dependentes de IRAK1/MYD88 na sinalização imunológica inata.

Cirl et al. (2008) mostraram que bactérias virulentas, como a E. coli uropatogênica e Brucella melitensis, homólogos inibidores segregados de proteínas contendo domínio TIR (TCPs). Estas TCPs promoveram a sobrevivência bacteriana intracelular e patologia renal após a instilação de organismos na bexiga do rato. As TCPs bacterianas impediram a sinalização de TLR através da MYD88 e prejudicaram a defesa inata do hospedeiro. A análise epidemiológica molecular de isolados clínicos de pacientes com infecções do trato urinário apoiou ainda mais a proposta de que as TCPs bacterianas representam uma classe de fatores de virulência.

Alu O acúmulo de RNA devido à deficiência de DICER1 (606241) no epitélio pigmentado da retina (RPE) está implicado na atrofia geográfica, uma forma avançada de degeneração macular relacionada à idade (DMRI; ver 603075). Usando células RPE de camundongos e ratos humanos sem vários genes, Tarallo et al. (2012) mostraram que um déficit DICER1 ou exposição ao RNA de Alu ativou o inflammasome NLRP3 (606416), desencadeando a sinalização MYD88 independente de TLR via IL18 (600953) na RPE. A inibição dos componentes inflammáticos, MYD88, ou IL18 preveniu a degeneração RPE induzida pela perda DICER1 ou exposição ao RNA de Alu. Como a RPE na atrofia geográfica humana continha NLRP3, PYCARD, e IL18 elevados, Tarallo et al. (2012) sugeriram que esta via fosse orientada para a prevenção e/ou tratamento da atrofia geográfica.

Zhu et al. (2012) mostraram que os efeitos diretos, imediatos e disruptivos da IL1-beta (IL1B; 147720) sobre a estabilidade endotelial em um modelo de célula humana in vitro são independentes da NF-kappa-B (ver 164011) e são, ao invés disso, o resultado da sinalização através do pequeno fator-6 da GTPase ADP-ribosilação (ARF6; 600464) e do seu ativador abridor de sítio de ligação de nucleotídeos ARF (ARNO; 602488). Além disso, Zhu et al. (2012) mostraram que a ARNO se liga diretamente à proteína adaptadora MYD88, e assim propuseram MYD88-ARNO-ARF6 como uma via de sinalização proximal IL1-beta distinta daquela mediada pela NF-kappa-B. Finalmente, Zhu et al. (2012) mostraram que o SecinH3 (182115), um inibidor dos fatores de troca da guanina nucleotídica ARF como a ARNO, melhora a estabilidade vascular e melhora significativamente os resultados em modelos animais de artrite inflamatória e inflamação aguda.

Zhang et al. (2015) utilizaram análises in vivo do envelhecimento em ratos para demonstrar que a atividade pró-inflamatória neutrofílica correlaciona-se positivamente com seu envelhecimento enquanto em circulação. Os autores constataram que os neutrófilos envelhecidos representam um subconjunto excessivamente ativo exibindo ativação da integrina alfa-M (120980)-beta-2 (600065) e formação de armadilha extracelular de neutrófilos sob condições inflamatórias. Zhang et al. (2015) mostraram que o envelhecimento dos neutrófilos é impulsionado pela microbiota via receptor tipo Toll-like (TLR4, 603030 e TLR2, 603028)- e MYD88-mediated signaling pathways. O esgotamento da microbiota reduziu significativamente o número de neutrófilos envelhecidos em circulação e melhorou drasticamente a patogénese e os danos de órgãos relacionados com a inflamação em modelos de doença falciforme (603903) ou choque séptico induzido por endotoxinas. Zhang et al. (2015) concluíram que seus resultados identificaram um papel para a microbiota na regulação de um subconjunto de neutrófilos promotores de doenças.

Phelan et al. (2018) usaram o rastreio genomewide CRISPR/Cas9 e proteómica funcional para determinar a base molecular de respostas clínicas excepcionais ao ibrutinibe no linfoma difuso de grandes células B (DLBCL; ver 605027). Phelan et al. (2018) descobriram um novo modo de sinalização do receptor oncogênico de células B (BCR) em linhas celulares e biópsias de ibrutinibe, coordenadas por um supercomplexo multiproteico formado por MYD88, TLR9, e o BCR. O supercomplexo MYD88-TLR9-BCR coloca-se com mTOR em endolissomas, onde conduz a sinalização prosurvival NF-kappa-B (ver 164011) e mTOR (601231). Os inibidores da sinalização BCR e mTOR diminuíram cooperativamente a formação e função do supercomplexo MYD88-TLR9-BCR, fornecendo uma visão mecanicista da sua toxicidade sinérgica para as células DLBCL que contêm este complexo. A presença destes supercomplexos caracterizou as malignidades de ibrutinibe e distinguiu os respondedores de ibrutinibe dos não respondedores.

Hardiman et al. (1997) descreveram a estrutura genética do gene MyD88 do rato. A sequência de codificação completa abrange 5 exons.

Bonnert et al. (1997) descobriram que o gene humano MYD88 é codificado por 5 exons.

Pelo mapeamento retrocruzado interespecífico, Hardiman et al. (1997) localizaram o gene MyD88 do rato no cromossoma 9; o homólogo humano foi mapeado para 3p22-p21.3 pela análise PCR de um painel de mapeamento híbrido de células somáticas do cromossoma 3. Bonnert et al. (1997) utilizaram a hibridação in situ fluorescente para mapear o gene humano MYD88 para o 3p22-3p21.3.

Estrutura de Cristal

Lin et al. (2010) relataram a estrutura de cristal do complexo de domínios de morte MyD88-IRAK4 (606883)-IRAK2 (603304), que revelou um oligómero helicoidal esquerdo que consiste em 6 domínios de morte MyD88, 4 IRAK4, e 4 IRAK2. A montagem desta torre de sinalização helicoidal é hierárquica, na qual MyD88 recruta o IRAK4 e o complexo MyD88-IRAK4 recruta os substratos IRAK4 IRAK2 ou o IRAK1 relacionado. A formação destes complexos myddosome aproxima os domínios kinase dos IRAKs para a fosforilação e ativação. Para o recrutamento dos domínios de morte individuais no complexo, que são confirmados por mutagênese e mutações de sinalização previamente identificadas, são necessários sítios de ligação compostos. As especificidades da formação de mitosomas são ditadas tanto pela complementação molecular como pela correspondência da eletrostática de superfície.

Imunodeficiência 68

Von Bernuth et al. (2008) identificou 3 mutações diferentes no gene MYD88 em crianças com imunodeficiência-68 (IMD68; 612260) que resultaram em susceptibilidade a infecções bacterianas piogénicas. Quatro crianças de 3 espécies eram homozigotos para a eliminação de cola52 (E52del; 602170.0001). Dois irmãos eram homozigotos para uma mutação missense (R196C; 602170.0002), e uma criança de outro tipo era heterozigoto composto para 2 mutações missense (R196C e L93P, 602170.0003). Dois irmãos que morreram na infância eram presumivelmente homozigotos para a mesma mutação E52del encontrada em seu irmão sobrevivente. As mutações não foram encontradas em controles saudáveis, e todos os resíduos afetados foram conservados. Fibroblastos de pacientes representando as 3 combinações de alelos MYD88 mutantes mostraram níveis normais de MYD88 mRNA. A análise Western blot revelou níveis baixos de proteína MYD88 com a mutação homozigota E52del e a mutação heterozigota composta L93P/R196C, e níveis normais de proteína MYD88 com a mutação homozigota R196C. A análise funcional confirmou que as mutações resultaram em resposta prejudicada à maioria dos receptores Toll-like e IL1B, com falta de produção de IL6, IL8, e gama-IFN. Os resultados foram consistentes com uma perda de função. Von Bernuth et al. (2008) concluíram que, assim como a deficiência de IRAK4 (IMD67; 607676), a deficiência de MYD88 suprime a maioria das respostas de citocinas à estimulação de TLR. Os autores observaram que o fenótipo imunológico das nove crianças que relataram deficiência de MYD88 era semelhante ao dos ratos com deficiência de Myd88, mas o fenótipo infeccioso era diferente. Os pacientes com deficiência de MYD88 eram susceptíveis ao Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa e Streptococcus pneumoniae, mas normalmente eram resistentes à maioria dos outros agentes infecciosos. Em contraste, os ratos com deficiência de Myd88 mostraram ser suscetíveis a quase todos os agentes patogénicos testados.

Em membros afetados de uma grande família consanguínea com IMD68, Conway et al. (2010) identificaram uma mutação homozigotos sem sentido no gene MYD88 (E66X; 602170.0005). A análise Western blot das células de pacientes mostrou ausência da proteína MYD88. Estudos imunológicos detalhados mostraram uma resposta prejudicada à maioria dos estímulos receptores do tipo Toll-, com diminuição significativa da produção de TNFA, IL6, e IL1B em comparação com os controles. O fenótipo foi notável para infecção cutânea e sistêmica por Pseudomonas, assim como meningite pneumocócica.

Em um menino, nascido de pais consanguíneos Omani, com IMD68, Platt et al. (2019) identificaram uma mutação homozigotos sem sentido no gene MYD88 (R272X; 602170.0006). A mutação, que foi encontrada por sequenciamento direcionado de próxima geração e confirmada pelo sequenciamento Sanger, foi encontrada apenas em estado heterozigoto a uma baixa freqüência na base de dados gnomAD (1,19 x 10(-5)). As células do paciente não tinham nenhum tipo selvagem detectável ou proteína MYD88 truncada. Estudos funcionais de fibroblastos de pacientes mostraram resposta deficiente de citocinas ao LPS, certos receptores tipo Toll-like e IL1B, enquanto que a resposta ao poli(I:C) e TNFA foi normal.

Macroglobulinemia de Waldenstrom

Para uma discussão da mutação somática da MYD88 na gamopatia monoclonal IgM de significância indeterminada (MGUS) e na macroglobulinemia de Waldenstrom (153600), ver 602170.0004.

Adachi et al. (1998) observaram que ratos com uma perturbação orientada do gene Myd88 eram incapazes de responder à IL1 (por exemplo, 147760), como determinado pela proliferação de células T defeituosas e a produção de citocinas. Da mesma forma, os ratos com deficiência de Myd88 foram incapazes de produzir interferão gama (IFNG; 147570) e mediar a atividade natural das células assassinas em resposta à IL18 (600953). A ativação da NFKB em resposta à IL1 ou IL18 também foi prejudicada. Estes resultados indicaram que o MYD88 é um componente crítico na IL1R e na IL18R (604494), sinalizando as cascatas. Kawai et al. (1999) estenderam estes estudos para mostrar que as respostas ao lipopolissacarídeo, mediadas por TLR4 e CD14 (158120), foram perdidas ou atrasadas em ratos com deficiência de Myd88, estabelecendo que o MYD88 também faz parte da cascata de sinalização TLR, actuando apenas a montante do IRAK.

Takeuchi et al. (2000) mostraram que os ratos Tlr2 (603028)- e, particularmente, os ratos com deficiência de Myd88 são altamente susceptíveis, em termos de crescimento no sangue e nos rins e diminuição da sobrevivência, à infecção com Staphylococcus aureus em comparação com os ratos do tipo selvagem. In vitro, macrófagos deficientes em Tlr2 produziram TNF e interleucina-6 reduzidos (IL6; 147620) em resposta a S. aureus em comparação com macrófagos do tipo selvagem ou deficientes em Tlr4, enquanto os macrófagos deficientes em Myd88 não produziram TNF ou IL6 detectáveis. Os autores concluíram que o TLR2 e o MYD88 são críticos na defesa contra bactérias gram-positivas.

Skerrett et al. (2004) descobriram que ratos com Myd88-deficiente eram altamente suscetíveis à infecção por aerossol com Pseudomonas aeruginosa, mas não à infecção por aerossol com S. aureus. Eles concluíram que a sinalização dependente de Myd88 é essencial para a imunidade inata à P. aeruginosa e é dispensável para resistência à infecção pulmonar por S. aureus.

Usando estímulos microbianos não letais em camundongos deficientes de Il12b (161561), Jankovic et al. (2002) mostraram que embora a produção de citocinas do tipo Th1 tenha diminuído na ausência de Il12b, as células T Cd4 (186940)-positivas ao patógeno que surgiram apresentaram um perfil linfocinético dominado por Ifng e falharam no fenótipo Th2. Em camundongos sem Il12b e Il10 (124092), estas células Th1 eram protetoras. Em contraste, em camundongos sem Myd88, não só foi desenvolvida uma resposta normal do tipo Th2 aos antígenos de Schistosoma mansoni, mas, em resposta aos antígenos de Toxoplasma gondii, não foi detectado nenhum Ifng e os camundongos não apresentaram uma resposta do tipo Th2. Jankovic et al. (2002) propuseram que a polarização Th1 induzida por micróbios seja determinada durante o encontro inicial de patógenos com receptores de reconhecimento de padrão (por exemplo, TLRs) em células que apresentam antígenos. Eles concluíram que a IL12, entretanto, não determina o fenótipo Th1 versus Th2.

LaRosa et al. (2008) geraram quimeras de medula óssea nas quais células T, mas não células envolvidas em respostas imunes inatas, careciam de Myd88. Estes camundongos quiméricos mostraram maior suscetibilidade à doença de T. gondii, desenvolvendo encefalite fatal em 30 dias. Eles mostraram redução da produção de Ifng, e o aumento da susceptibilidade foi independente da sinalização de Il1r e Il18r. LaRosa et al. (2008) propuseram que, além da imunidade inata, a expressão MYD88 é necessária nas células T para resistência prolongada a patógenos.

Bjorkbacka et al. (2004) examinaram o desenvolvimento de lesão aterosclerótica em ratos Apoe não infectados (APOE; 107741) single-null e Apoe -/- Myd88 -/- double-null, e descobriram que os ratos Myd88-deficientes mostraram uma redução acentuada na aterosclerose precoce. A inativação da via do Myd88 levou a uma redução na aterosclerose através de uma diminuição no recrutamento de macrófagos para a parede arterial que estava associada com a redução dos níveis de quimiocina. Os achados ligaram níveis elevados de lipídios séricos a uma cascata de sinalização pró-inflamatória que também está envolvida por patógenos microbianos.

Para examinar se a sinalização do receptor Toll-like regula a fagocitose, Blander e Medzhitov (2004) compararam macrófagos do tipo selvagem, Myd88 null, e Tlr2-Tlr4 (603030) double-null mice. Myd null e Tlr2-Tlr4 macrófagos duplos nulos não responderam à E. coli inativada. Blander e Medzhitov (2004) descobriram que a ativação da via de sinalização do receptor Toll-like por bactérias, mas não por células apoptóticas, fagocitose regulada em múltiplos passos, incluindo a internalização e maturação do fagosoma. A fagocitose das bactérias foi prejudicada pela ausência de sinalização do receptor de Toll-like. Dois modos de maturação do fagosoma foram observados, constitutivos e induzíveis; seu engajamento diferencial dependia da capacidade da carga de acionar a sinalização do receptor tipo Toll-like.

Fremond et al. (2004) notaram que investigações anteriores sugeriram um papel menor e redundante para TLR2, TLR4 e TLR6 (605403) na resposta precoce do hospedeiro à infecção por Mycobacterium tuberculosis (Mtb), mas um papel mais importante no controle da infecção crônica. Usando ratos Myd88 -/-, Fremond et al. (2004) investigaram o papel do MYD88, que a maioria dos TLR, exceto o TLR3 (603029), usa como um adaptador intracelular, em resistência ao Mtb. Macrófagos de Myd88 -/- ratos tinham upregulação normal de moléculas co-estimuladoras, mas reduziram a produção de citocinas em resposta à infecção por Mtb. Myd88 -/- ratos sucumbiram a uma dose baixa de infecção por Mtb em aproximadamente 4 semanas, enquanto que os ratos Tnf -/- morreram em 3 semanas, e os ratos do tipo selvagem sobreviveram. A morte foi acompanhada por uma redução significativa do peso corporal, aumento do peso pulmonar e 2 logs de carga bacilar mais elevada. Como o Tnf -/- ratos, o Myd88 -/- ratos desenvolveram necrose maciça e infiltração de células inflamatórias, principalmente neutrófilos e macrófagos, nos pulmões. Embora a vacinação com BCG não tenha conseguido obter uma resposta de hipersensibilidade retardada em camundongos Myd88 -/-, ela induziu a produção de Ifng específica de antígenos em esplenócitos e também protegeu os camundongos da infecção aguda por Mtb. Os camundongos Myd88 -/- não conseguiram, contudo, controlar a infecção de forma duradoura. Fremond et al. (2004) concluíram que a via de sinalização mediada pelo MYD88 está criticamente envolvida no desenvolvimento da imunidade inata, mas não adaptativa, em resposta à infecção por MYD88 -/-.

Usando ratos sem Myd88 ou vários membros da superfamília IL1R/TLR, Bellocchio et al. (2004) descobriram que a via dependente de Myd88 era necessária para resistência a Candida albicans e Aspergillus fumigatus. A sinalização do Myd88 poderia ocorrer através de distintas TLRs, dependendo do patógeno fúngico e da rota da infecção, e TLRs individuais ativaram funções antifúngicas antifúngicas especializadas nos neutrófilos. A sinalização dependente de Myd88 em células dendríticas foi crucial para a preparação da resposta do antifúngico Th1. Bellocchio et al. (2004) concluíram que a imunidade inata e adaptativa a C. albicans e A. fumigatus requer a ação coordenada de membros distintos da superfamília IL1R/TLR atuando através da MYD88.

Para avaliar o papel dos TLRs na ativação das células B e na produção de anticorpos, Pasare e Medzhitov (2005) transferiram células B purificadas do tipo selvagem, Myd88-deficiente, Tlr4-deficiente, e Cd40 (109535)-deficiente em camundongos mu-MT-deficientes em células B, que têm uma mutação no gene Ighm (147020). Eles descobriram que a ativação primária das células B, incluindo a indução de respostas IgM, IgG1 e IgG2, mas não IgE ou, provavelmente, respostas IgA, exigiam TLRs além das células T helper. Em contraste, o Cd40 foi necessário para a comutação de isótipos.

Hyaluronan, um glicosaminoglicano de matriz extracelular com uma estrutura dissacarídeo de repetição, é produzido após lesão tecidual, e uma folga prejudicada resulta em uma inflamação incessante. Jiang et al. (2005) observaram que o CD44 (107269) é essencial para regular o turnover do hialuronano, mas não é necessário para a expressão de quimiocinas por macrófagos após lesão pulmonar. Usando macrófagos de camundongo deficientes em Tlr, eles descobriram que fragmentos de hialuronan estimulavam Mip2 (CXCL2; 139110), Mip1a (CCL3; 182283) e Kc (CXCL1; 155730) de forma dependente de Tlr2 e Tlr4 que também exigiam Myd88. Ratos deficientes em Tlr2, Tlr4, ou Myd88 mostraram migração transepitélica prejudicada de células inflamatórias, mas diminuíram a sobrevivência e aumentaram a apoptose epitelial das células após lesão pulmonar. A sobreexpressão das células epiteliais pulmonares de hialuronan de alta massa molecular protegidas contra lesão pulmonar aguda e apoptose, em parte, através da ativação basal dependente de TLR da NFKB. Jiang et al. (2005) concluíram que a interação de TLR2 e TLR4 com hialuronan fornece sinais que iniciam respostas inflamatórias, mantêm a integridade da célula epitelial e promovem a recuperação da lesão pulmonar aguda.

Ratos geneticamente deficientes tanto em Myd88 como em Trif (607601) têm uma completa falta de sinalização do receptor Toll-like conhecido, permitindo assim a avaliação da dependência do receptor Toll-like das respostas de anticorpos. Gavin et al. (2006) usaram esses duplos nocauteados para investigar o papel da sinalização do receptor tipo Toll-like nas respostas de anticorpos à imunização e o aumento do papel de 4 adjuvantes típicos (alúmen, adjuvante completo Freund, adjuvante incompleto Freund e adjuvante monofosforil-lipídeo A/trealose dicorinomicolato) a essa resposta. Independentemente do adjuvante, esses ratos exibiram respostas robustas de anticorpos. Gavin et al. (2006) concluíram que a sinalização do receptor tipo Toll-like não contabiliza a ação dos adjuvantes clássicos e não explica completamente a ação de um adjuvante forte contendo um ligante receptor tipo Toll-like.

Brown et al. (2007) descobriram que Myd88 -/- ratos e Ptgs2 -/- ratos mostraram uma profunda inibição da proliferação endotelial e organização celular dentro das criptas retais após a lesão. Os efeitos da lesão em ambas as cepas de camundongos mutantes poderiam ser resgatados pela prostaglandina exógena E2 (PGE2), sugerindo que a sinalização Myd88 está a montante de Ptgs2 e PGE2. Em ratos do tipo selvagem, a combinação de lesão e sinalização Myd88 levou ao reposicionamento de um subconjunto de células estromais Ptgs2-expressoras do mesênquima que envolve as criptas média e superior para uma área ao redor da base da cripta adjacente às células epiteliais progenitoras do cólon. Brown et al. (2007) concluíram que as vias de sinalização MYD88 e prostaglandina interagem para preservar a proliferação epitelial durante a lesão, e que a mobilização celular adequada dentro do nicho da cripta é crítica para reparar após a lesão.

Apc (611731) Ratos Min/+ desenvolvem espontaneamente tumores intestinais e, em média, morrem dentro de 6 meses de idade. Rakoff-Nahoum e Medzhitov (2007) mostraram que a deleção de Myd88 em camundongos Min/+ reduziu a morbidade e mortalidade, assim como o tamanho e o número de pólipos intestinais, em comparação com os controles de sexo e idade. Eles concluíram que a sinalização dependente do MYD88 controla a expressão de vários genes modificadores chave da tumorigenese intestinal e que o MYD88 tem um papel crítico tanto no desenvolvimento espontâneo como no desenvolvimento de tumores induzidos por carcinógenos.

Wen et al. (2008) mostraram que ratos específicos livres de patógenos sem Myd88, um adaptador para múltiplos receptores imunes inatos que reconhecem estímulos microbianos, não desenvolvem diabetes tipo 1 (222100). O efeito é dependente de micróbios comensal porque os camundongos Myd88-negativos da NOD sem germes desenvolvem diabetes robusto, enquanto que a colonização destes camundongos Myd88-negativos da NOD sem germes com um consórcio microbiano definido (representando filas bacterianas normalmente presentes no intestino humano) atenua a diabetes tipo 1. Wen et al. (2008) também descobriram que a deficiência de Myd88 altera a composição da microbiota intestinal distal, e que a exposição à microbiota de doadores de Myd88-negativos de NOD específicos isentos de patógenos atenua a diabetes tipo 1 em receptores de NOD isentos de germes. Wen et al. (2008) concluíram que, considerados em conjunto, seus achados indicaram que a interação dos micróbios intestinais com o sistema imunológico inato é um fator epigenético crítico modificando a predisposição para a diabetes tipo 1.