SledgeEdit
Um microtoma de trenó é um dispositivo onde a amostra é colocada num suporte fixo (vaivém), que depois se move para trás e para a frente através de uma faca. Microtomos de trenó modernos têm o trenó colocado sobre um rolamento linear, um design que permite ao microtomo cortar prontamente muitas secções grosseiras. Ao ajustar os ângulos entre a amostra e a faca do micrótomo, a pressão aplicada à amostra durante o corte pode ser reduzida. As aplicações típicas para este desenho de micrótomo são da preparação de amostras grandes, como as embutidas em parafina para preparações biológicas. A espessura típica de corte atingível num micrótomo de marreta é entre 1 e 60 μm.
RotaryEdit
Este instrumento é um desenho comum de micrótomo. Este dispositivo funciona com uma acção rotativa faseada de tal forma que o corte real é parte do movimento rotativo. Num micrótomo rotativo, a faca é tipicamente fixada numa posição horizontal.
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Na figura à esquerda, explica-se o princípio do corte. Através do movimento do suporte de amostras, a amostra é cortada pela posição da faca 1 até a posição 2, momento em que a seção fresca permanece sobre a faca. No ponto mais alto do movimento rotativo, o suporte de amostras é avançado pela mesma espessura da secção a ser feita, permitindo que a secção seguinte seja feita.
O volante em muitos microtomos pode ser operado manualmente. Isto tem a vantagem de poder ser feito um corte limpo, pois a massa relativamente grande do volante evita que a amostra seja parada durante o corte da amostra. O volante de inércia em modelos mais recentes é frequentemente integrado dentro da caixa do micrótomo. A espessura típica de corte para um micrótomo rotativo é entre 1 e 60 μm. Para materiais duros, como uma amostra embutida numa resina sintética, este desenho do micrótomo pode permitir boas secções “semi-finas” com uma espessura tão baixa como 0,5 μm.
CryomicrotomeEdit
Para o corte de amostras congeladas, muitos micrótomos rotativos podem ser adaptados para cortar numa câmara de nitrogénio líquido, numa instalação chamada criomicrotoma. A temperatura reduzida permite aumentar a dureza da amostra, por exemplo, através de uma transição vítrea, o que permite a preparação de amostras semi-finas. Entretanto, a temperatura da amostra e da faca deve ser controlada para otimizar a espessura resultante da amostra.
UltramicrotomoEdit
Um ultramicrotomo é uma ferramenta principal do ultramicrotomo. Permite a preparação de secções extremamente finas, com o dispositivo a funcionar da mesma forma que um micrótomo rotativo, mas com tolerâncias muito apertadas sobre a construção mecânica. Como resultado da cuidadosa construção mecânica, a expansão térmica linear da montagem é utilizada para proporcionar um controle muito fino da espessura.
Estes cortes extremamente finos são importantes para uso com microscópio eletrônico de transmissão (TEM) e microscopia eletrônica de varredura em bloco serial (SBFSEM), e às vezes também são importantes para microscopia ótica leve. A espessura típica destes cortes situa-se entre 40 e 100 nm para microscopia electrónica de transmissão e muitas vezes entre 30 e 50 nm para SBFSEM. As secções mais espessas até 500 nm de espessura também são tomadas para aplicações especializadas em TEM ou para secções de levantamento por microscopia ligeira para seleccionar uma área para as secções finas finais. Facas de diamante (de preferência) e facas de vidro são usadas com ultramicrotomos. Para recolher as secções, elas são flutuadas em cima de um líquido à medida que são cortadas e são cuidadosamente recolhidas em grelhas adequadas para a visualização de amostras TEM. A espessura da seção pode ser estimada pelas cores de interferência de película fina de luz refletida que são vistas como resultado da espessura extremamente baixa da amostra.
VibratingEdit
O micrótomo vibratório funciona cortando com uma lâmina vibratória, permitindo que o corte resultante seja feito com menos pressão do que seria necessário para uma lâmina estacionária. O micrótomo vibratório é normalmente usado para amostras biológicas difíceis. A espessura de corte é geralmente de 30-500 μm para tecido vivo e 10-500 μm para tecido fixo.
Uma variação no micrótomo vibratório é o micrótomo Compresstome. O Compresstome usa uma seringa de amostra ou um tubo “tipo batom” para segurar o tecido. A amostra de tecido é completamente embutida em agarose (um polissacarídeo), e o tecido é lenta e suavemente pressionado para fora do tubo para que a lâmina vibratória possa cortar. O dispositivo funciona da seguinte forma: a extremidade do tubo da amostra onde o tecido emerge é ligeiramente mais estreita do que a extremidade de carga, o que permite uma “compressão” suave do tecido à medida que este sai do tubo. A ligeira compressão impede a formação de artefatos de cisalhamento, corte desigual e vibração. Observe que a tecnologia de compressão não danifica ou afeta o tecido a ser seccionado.
Existem várias vantagens do micrótomo Compresstome: 1) a inserção de agarose proporciona estabilidade a todo o espécime em todos os lados, o que evita o corte ou cisalhamento desigual do tecido; 2) a tecnologia de compressão comprime suavemente o tecido para corte uniforme, de modo que a lâmina não empurre contra o tecido; 3) o corte mais rápido do que a maioria dos micrótomos vibrantes; e 4) corta bem o tecido de animais mais velhos ou mais maduros para fornecer tecidos mais saudáveis.
SawEdit
O micrótomo da serra é especialmente para materiais duros, como dentes ou ossos. O micrótomo deste tipo tem uma serra rotativa rebaixada, que corta através da amostra. A espessura mínima de corte é aproximadamente 30 μm e pode ser feita para amostras comparativamente grandes.
LaserEdit
O micrótomo laser é um instrumento para corte sem contacto. A preparação prévia da amostra através de embutimento, congelamento ou fixação química não é necessária, minimizando assim os artefatos dos métodos de preparação. Alternativamente este desenho do micrótomo também pode ser usado para materiais muito duros, como ossos ou dentes, assim como algumas cerâmicas. Dependendo das propriedades do material da amostra, a espessura alcançável é entre 10 e 100 μm.
O dispositivo opera usando uma ação de corte de um laser infravermelho. Como o laser emite uma radiação no infravermelho próximo, neste regime de comprimento de onda o laser pode interagir com materiais biológicos. Através da focalização nítida da sonda dentro da amostra, um ponto focal de altíssima intensidade, até TW/cm2, pode ser alcançado. Através da interação não-linear da penetração óptica na região focal é introduzida uma separação do material num processo conhecido como foto-disrupção. Ao limitar a duração do pulso laser à faixa de femtossegundos, a energia gasta na região alvo é precisamente controlada, limitando assim a zona de interação do corte a menos de um micrómetro. Externamente a esta zona o tempo de aplicação do feixe ultra curto introduz o mínimo de dano térmico ao resto da amostra.
A radiação laser é direccionada para um sistema óptico de varrimento rápido baseado em espelho, que permite o posicionamento tridimensional do crossover do feixe, ao mesmo tempo que permite o atravessamento do feixe para a região de interesse desejada. A combinação de alta potência com uma alta taxa raster permite ao scanner cortar grandes áreas de amostra em um curto espaço de tempo. No micrótomo laser também é possível a microdissecção de áreas internas em tecidos, estruturas celulares e outros tipos de pequenas características.