Secondo quanto riferito, la Jackson iniziò con la sfida di partecipare ad una gara di talento nel 1964 al nightclub Smalls Paradise di Harlem, che lei vinse. Anche se ha registrato per la prima volta per la MGM Records nel 1970, ha presto lasciato e ha iniziato una lunga collaborazione con la Spring Records di New York. Lavorando con il produttore interno dell’etichetta, Raeford Gerald, il suo primo singolo in classifica fu “A Child of God (It’s Hard to Believe)” del 1971, dal titolo ingannevole, che raggiunse il numero 22 nella classifica R&B. Nel 1972, Jackson ebbe il suo primo singolo R&B Top Ten con il follow-up, “Ask Me What You Want”, che raggiunse anche la Top 30 pop, poi “My Man, A Sweet Man” raggiunse il numero 7 R&B e 50 nella UK Singles Chart; tutte e tre le canzoni furono co-scritte da Jackson. “My Man, A Sweet Man” consiste in northern soul come la sua registrazione del 1976 “A House for Sale”. L’anno seguente portò il suo terzo successo nella top ten statunitense, “It Hurts So Good”, che raggiunse il numero 3 della classifica R&B e il numero 24 della classifica US Billboard Hot 100 pop. Il singolo fu inserito nell’album omonimo e nel film di blaxploitation Cleopatra Jones.
Nel 1974, pubblicò l’album Caught Up, che introdusse il suo stile innovativo di parole parlate sconce. L’uscita principale fu la sua versione del milione di copie vendute di Luther Ingram, “(If Loving You Is Wrong) I Don’t Want to Be Right”, per la quale ricevette due nomination ai Grammy. Ormai aveva cambiato produttore per lavorare solo con Brad Shapiro, che era stato coinvolto in “It Hurts So Good” e “Love Doctor”. Lavorando al Muscle Shoals Studio in Alabama con la rinomata Muscle Shoals Rhythm Section, continuò a registrare lì la maggior parte del suo materiale per Spring, incluso l’album successivo, Still Caught Up. Nei dieci anni successivi, la Jackson ebbe una serie di album di successo e numerose entrate nelle classifiche R&B, la più grande delle quali fu la sua versione del 1977 del successo country di Merle Haggard “If You’re Not Back in Love By Monday”. Quel singolo fu seguito da molti altri, inclusa la sua versione della canzone di Boney M., il singolo da discoteca “Never Change Lovers in the Middle of The Night”. Questo singolo raggiunse il numero 33 della classifica dei singoli neri nel 1979.
Jackson registrò un album nel 1979 con Isaac Hayes chiamato “Royal Rappin’s” e lo stesso anno pubblicò un doppio album, “Live And Uncensored”, registrato in concerto al locale di Los Angeles, The Roxy e “Live and Outrageous” al Mr. V’s Figure8 di Atlanta. Jackson ha anche formato e prodotto il gruppo Facts of Life. Ebbero un grande successo nel 1976 con “Sometimes” (#3 R&B, No. 31 Pop). La Jackson si trovò senza un’etichetta quando la Spring chiuse nel 1984, ma nel 1986 firmò con la Jive Records in un accordo che produsse quattro album e portò ad altri successi R&B Top Ten con “Hot! Wild! Unrestricted! Crazy Love” e “Love Is a Dangerous Game”. Apparve in un brano di Elton John nel 1985, “Act Of War”, che fu un successo Top 40 nel Regno Unito, ma non riuscì a entrare in classifica negli USA. Nel 1991, scrisse, produsse e recitò nella commedia itinerante di successo Young Man, Older Woman, basata sul suo album con lo stesso titolo per la Jive. Il 24 novembre 1994, la Jackson è apparsa nell’episodio del Ringraziamento Feast or Famine di Martin nel ruolo di Florine. Nel 2000, la sua voce è apparsa in “Am I Wrong” di Etienne de Crécy, campionata dalla sua performance in “(If Loving You Is Wrong) I Don’t Want to Be Right”.
Jackson è spesso apparsa nelle liste “worst ever” per le copertine dei suoi album. E.S.P. (Extra Sexual Persuasion) mostra la Jackson che scruta una sfera di cristallo che accentua la sua scollatura; Back to the S**t! raffigura la Jackson seduta su un water dove è implicito che stia defecando.
Jackson ora gestisce la sua etichetta discografica, Weird Wreckuds. Dopo una lunga pausa dalla registrazione, ha pubblicato il suo album del 2001, Not For Church Folk, che ha segnato un ritorno al suo stile con un suono urbano contemporaneo. L’album contiene i singoli “Butt-A-Cize” e “Leave Me Alone”. L’album contiene anche una collaborazione con il rapper Da Brat nella canzone “In My Life”. Jackson ha avuto il suo programma radiofonico a Dallas, Texas, per 13 anni. Trasmettendo in remoto dalla sua casa di Atlanta, Georgia, Jackson ha lavorato nel drive-time pomeridiano dalle 15 alle 18 su KKDA 730 AM, fino al 6 gennaio 2012.
Nel 2006, cinque degli album più venduti di Jackson – Millie Jackson (1972), It Hurts So Good (1973), Caught Up (1974), Still Caught Up (1975), e Feelin’ Bitchy (1977) – sono stati rimasterizzati digitalmente e pubblicati su CD con tracce bonus. Tutti gli album di Jackson dell’era Spring Records sono disponibili dalla Ace Records nel Regno Unito. An Imitation of Love è stato ristampato su CD nel 2013 dall’etichetta Funkytowngrooves in un’edizione rimasterizzata ed espansa. Altri album pubblicati sulle etichette Jive e Ichiban rimangono fuori stampa, anche se alcune di queste canzoni appaiono su CD compilation. Il 6 febbraio 2012, il documentario Unsung – The Story of Mildred ‘Millie’ Jackson è andato in onda sulla rete TV One. Jackson si è esibita allo storico Howard Theatre di Washington, D.C. il 3 agosto 2012, e al B.B. King’s Blues Club di New York il 4 agosto 2012. Il 6 giugno 2015 Jackson è stato inserito nella Official Rhythm & Blues Music Hall of Fame a Clarksdale, Mississippi.