Charles V teve que encontrar outro retrato, da Áustria o que Isabella de Portugal enviou para Margret antes de morrer. Sua irmã mandou o retrato em novembro Charles ficou muito decepcionado por não parecer um para sua esposa. Ficando descontente com o retrato ele teve que pedir a Ticiano para encontrar uma arte parecida com a sua esposa.
Ticiano pintou retratos de Isabella em 1545, Ticiano forneceu-o e Charles esposa tinha vestido preto e no seu colo ela tinha flores atrás dela ela tinha uma coroa magnífica. No palácio do EI Pardo esta arte foi destruída com um incêndio esta história está em estampas e várias cópias. O retrato tinha perdido o nariz e Charles levou-o para Augsburg para que o artista pudesse trabalhar nele para pintar de novo o nariz. Em setembro de 1548 o artista usou o modelo antigo para fazer o atual e também foi pintado em Augsburg. Charles e Isabella tinham um retrato juntos e um duplicado na Fundacion Casa de Alba Collection em Madrid, esta foi a melhor e a primeira combinação de Isabella de Portugal e Charles V.
A arte de Ticiano trouxe lembranças de Isabella de Portugal e aquela que tinha ambos lembrado a Charles sua esposa. Charles estava a pedir as artes e ele não queria pinturas exactas mas queria visualizar as que tinha na sua mente. Charles queria que Ticiano pintasse o retrato do nariz perdido porque ele podia pintar da maneira que o nariz aparecia. Os retratos feitos durante a sua vida pareceram reais, mostraram como Isabella de Portugal tinha um nariz aquilino isto, foi uma característica única que foi notada por muitos. Ticiano teve que fazer a mesma correcção de um nariz clássico reto para um curvo que Isabella de Portugal tinha. As pequenas coisas nos retratos que trouxeram memórias de Isabel fizeram com que Carlos mantivesse as artes por perto e tudo isso é guardado em documentos como Yuste e Bruxelas onde o último foi documentado em 1556 e o primeiro em 1558.
Os retratos que Ticiano fez eram próximos aos de Giulio Romano. O de Eleonora Gonzaga e Duquesa Urbino é o que Ticiano parecia e usou as habilidades dos quadros para fazer retratos de Isabella. As imagens de Isabella de Portugal foram de alguma forma desafiantes, pois não era uma realidade, mas apenas uma para trazer de volta as memórias. Os retratos de Isabella de Portugal foram um grande trabalho feito por Ticiano, no entanto, se olhados de perto, mostrou que a tela usada anteriormente era uma arte de uma mulher. A tela pintada Isabel de Portugal foi dada a Maria, irmã de Filipe a segunda. Era para um convento chamado Descalzas Reales. Em 1636 foi tirada em Madrid em Alcazar e lá permaneceu durante os mesmos anos até quando houve um incêndio em 1734.
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