Ez az áttekintés a Förster-rezonancia energiaátvitel (FRET) mikroszkópia új fejleményeit és annak alkalmazását a sejtreceptorokra tárgyalja. A módszer a FRET kinetikai elméletén alapul, amely nemcsak dimerekben, hanem donor és akceptor fluorofórok magasabb rendű oligomerjeiben is képes a FRET előrejelzésére. Az ilyen FRET-előrejelzéseken alapuló modellek illeszthetők a megfigyelt FRET-hatékonysági hisztogramokhoz (más néven FRET-spektrogramokhoz), és felhasználhatók az intracelluláris kötési állandók, a szabad energiaértékek és a sztöchiometriák becslésére. Ezeket a “FRET-spektrometriás” módszereket a sejtek jelátviteli útvonalaiban különböző receptorok által alkotott oligomerek elemzésére használták, de egészen a közelmúltig az ilyen vizsgálatok a sejtfelszínen található receptorokra korlátozódtak. A sejt belsejében található komplexek tanulmányozására kifejlesztették a Quantitative Micro-Spectroscopic Imaging (Q-MSI) nevű technikát. A Q-MSI kombinálja a kvaterner szerkezet meghatározását a pixel-szintű látszólagos FRET-spektrogramokból a donor- és akceptorkoncentrációk meghatározásával a szervsejtek szintjén. Ez egy harmadik fluoreszcens marker spektrumának felbontásával és elemzésével történik, amely nem vesz részt a FRET-ben. A Q-MSI-t először olyan citoplazmatikus receptorok egy osztályának kölcsönhatásának tanulmányozására használták, amelyek vírusos RNS-t kötnek és vírusellenes választ jeleznek főként mitokondriális membránokon kialakuló komplexeken keresztül. A Q-MSI feltárta az RNS mitokondriális receptorok korábban ismeretlen orientációit, valamint az LGP2 nevű vírus RNS-receptor és a hepatitis vírus által kódolt RNS-helikáz közötti kölcsönhatást. Ezen új megfigyelések biológiai jelentőségét tárgyaljuk.

Vélemény, hozzászólás?

Az e-mail-címet nem tesszük közzé.