A nephelometria az immunológiában alkalmazott technika, amellyel számos vérplazmafehérje szintjét határozzák meg. Például az antitestek izotípusainak vagy osztályainak teljes szintjét: Immunglobulin M, immunglobulin G és immunglobulin A. Fontos a szabad könnyű láncok számszerűsítésében olyan betegségekben, mint a myeloma multiplex. A mennyiségi meghatározás fontos a betegség osztályozásához és a betegség nyomon követéséhez, miután a beteget kezelték (a kappa és lambda könnyűláncok közötti arány megnövekedett ferdülése a beteg kezelését követően a betegség kiújulására utal).

A szórt fénynek a mérendő mintától mért szögben történő mérésével történik. A diagnosztikai nefelometriában a Heidelberger-Kendall-görbe emelkedő ágát a reakció menetének optimalizálásával úgy hosszabbítják meg, hogy a legtöbb plazmafehérje (emberi vérből származó) mérési jele a Heidelberger-Kendall-görbe bal oldalára esik, még nagyon magas koncentráció esetén is.

Ezt a technikát széles körben alkalmazzák a klinikai laboratóriumokban, mivel viszonylag könnyen automatizálható. Azon az elven alapul, hogy az apró részecskék híg szuszpenziója a rajta áthaladó fényt (általában lézert) szórja, ahelyett, hogy egyszerűen elnyelné azt. A szórás mértékét úgy határozzák meg, hogy a fényt egy szögben (általában 30 és 90 fokos szögben) gyűjtik be.

Az antitestet és az antigént olyan koncentrációban keverik, hogy csak kis aggregátumok képződjenek, amelyek nem ülepednek le gyorsan az aljára. A fényszórás mennyiségét mérik és összehasonlítják az ismert keverékek szórásának mennyiségével. Az ismeretlen mennyiségét egy standard görbe alapján határozzuk meg.

A nephelometria alkalmazható akár antigén, akár antitest kimutatására, de általában úgy végzik, hogy az antitest a reagens, a beteg antigén pedig az ismeretlen. Az immunológiai orvosi laboratóriumban kétféle vizsgálat futtatható: “végponti nefelometria” és “kinetikus (sebességi) nefelometria”.

A végponti nefelometriás vizsgálatokat úgy végzik, hogy hagyják az antitest/antigén reakciót a végéig lefutni (amíg az összes jelenlévő reagens antitest és a jelenlévő betegminta antigén, amely képes aggregálódni, ezt meg nem teszi, és nem tud több komplex képződni). A nagy részecskék azonban kiesnek az oldatból, és hamis szórásmérést okoznak, ezért találták ki a kinetikus nefelometriát.

A kinetikus nefelometriában a szórás sebességét közvetlenül a reagens hozzáadása után mérik. Amíg a reagens állandó, a változás mértéke közvetlenül a jelenlévő antigén mennyiségével függ össze.

Vélemény, hozzászólás?

Az e-mail-címet nem tesszük közzé.