A metyrapon alkalmazható a mellékveseelégtelenség diagnózisában. A Metyrapone 30 mg/kg, maximális dózis 3000 mg, éjfélkor adják be általában uzsonnával együtt. Másnap reggel 8:00 és 9:00 között mérik a plazma kortizolt és a 11-deoxikortisolt. A 220 nmol/l alatti plazmakortisol a 11β-hidroxiláz megfelelő gátlását jelzi. Intakt hipotalamo-hipofízis-mellékvese tengellyel rendelkező betegeknél a CRH- és ACTH-szintek a csökkenő kortizolszintre adott válaszként emelkednek. Ez a szteroid prekurzorok növekedését eredményezi az útvonalban. Ezért ha a 11-deoxikortisolszint nem emelkedik, és 7 µg/dl (202 nmol/l) alatt marad, és az adrenokortikotrop hormon (ACTH) emelkedik, akkor ez erősen mellékvesekéreg-elégtelenségre utal. Ha sem a 11-deoxikortisol, sem az ACTH nem emelkedik, akkor ez erősen utal a hipotalamusz-hipofízis-mellékvese tengely károsodására akár az agyalapi mirigyben, akár a hipotalamuszban.

A metyraponteszt segíthet a Cushing-szindróma okának igazolásában. Az agyalapi mirigy diszfunkcióban és/vagy hypophysis microadenomában szenvedő betegek többsége növeli az ACTH-szekréciót metyraponra adott válaszként, míg a legtöbb ektopikus ACTH-termelő tumor nem. A hypophysis makroadenomák nem mindig reagálnak a metyraponra.

A metyrapont a Cushing-szindróma (ACTH-függő vagy független) hypercortisolismusának orvosi kontrolljára használják. A gyógyszeres kezelés célja a hypercortisolismus műtét előtti kontrolljának elérése, vagy a műtét (TSS, mellékvesekéreg-eltávolítás) után fennmaradó maradványbetegség kontrollja. Nem hosszú távú végleges kezelésre/gyógyításra szolgál, csak kiegészítő kezelésként (a Cushing-szindróma legtöbb oka esetén a műtét a gyógyítás célja). A Metyrapone tehát a mellékvese szteroidogenezisének gátlásával hat. Az egyik mellékhatás a szőrösödés (nőknél) a feleslegesen keletkező androgén prekurzorok miatt. A Cushing-szindróma orvosi kezelésére gyakran használt másik szer a ketokonazol (gombaellenes szer). Ez nem mutatja a hirsutizmus mellékhatását.